1.2型糖尿病男性患者血清睾酮水平低下对非酒精性脂肪肝的影响；2.棕榈酸通过CypD介导的线粒体应激抑制StAR表达

摘要

本文主要从以下几个部分进行论述：
　　第一部分 2型糖尿病男性患者血清睾酮水平低下对非酒精性脂肪肝的影响
　　目前，大量临床研究数据表明，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)与肥胖症、血脂异常症及2型糖尿病(T2DM)等代谢相关性疾病呈明显相关关系，T2DM患者NAFLD的患病率明较非T2DM患者显著增高，糖尿病等代谢疾病导致的胰岛素抵抗及内脏脂肪堆积已被证明为NAFLD的独立危险因素。血清总睾酮水平亦与代谢综合征密切相关，流行病学调查显示，男性血清总睾酮水平与体质量指数(BMI)及甘油三酯(TG)呈负相关关系，且男性血清睾酮水平低下所导致的中心性肥胖也是NAFLD的危险因素之一，但在患T2DM的男性人群中，睾酮水平与NAFLD间是否存在相关关系尚不明确。
　　目的:探讨T2DM男性患者血清总睾酮水平与NAFLD的相关关系。
　　方法:选取2013年1月至2015年9月山东大学附属省立医院内分泌科住院治疗的男性T2DM患者199例作为研究对象，应用腹部超声对其进行NAFLD临床诊断，根据超声结果将研究对象分为患NAFLD组及未患NAFLD组。进一步凭据超声检查程度将患NAFLD组分为轻度NAFLD组及中-重度NAFLD组。采用化学发光法检测血清总睾酮水平，测定空腹血糖(FBG)、空腹C肽、空腹胰岛素、血脂谱等相关血清学指标，稳态模式评估法测定胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采纳两独立样本的非参数检验、单因素及多因素有序回归分析分析血清总睾酮水平与NAFLD的相关性。运用t检验比较各严重程度NAFLD间的睾酮水平。运用Spearman秩相关分析睾酮水平与各血清学指标间的相关性。
　　结果:①患NAFLD组男性T2DM患者血清总睾酮水平明显低于未患NAFLD组，差异有统计学意义(3.29(2.54-4.21)Vs4.91(3.48-5.99)， P＜0.01）。②多因素有序回归分析显示对年龄、BMI、血清谷丙转氨酶(Alanineaminotransferase， ALT）、谷氨酰转肽酶(Gamma-glutamyl transpeptidase，GGT)等指标进行调整后，睾酮对NAFLD的OR值为0.68(95％CI:0.55-0.84，P＜0.01)。③中-重度NAFLD患者血清总睾酮水平低于轻度患者(3.06±1.11Vs3.65±1.45，P＜0.05)。
　　结论:男性T2DM患者血清总睾酮低下者更易患NAFLD，男性睾酮水平低下为NAFLD的独立危险因素。
　　第二部分 棕榈酸通过CypD介导的线粒体应激抑制StAR的表达
　　临床研究显示，超重及肥胖男性血清睾酮水平低于正常体重男性，肥胖及其所引起的血脂异常均与血清总睾酮水平降低密切相关。研究显示，线粒体功能损伤可以通过影响睾酮生物合成的关键酶类固醇激素合成急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein，StAR)的表达而影响睾酮的合成，而亲环素D(Cyclophilin D，CypD)介导的线粒体渗透转换孔(mitochondrialpermeability transition pore，mPTP)的开放在线粒体功能损伤中其重要作用，但肥胖及血脂异常能否通过影响CypD的表达从而影响睾酮合成尚不明确。
　　目的:探讨棕榈酸(Palmitic acid，PA)对睾酮合成过程的影响及其影响机制。
　　方法:体外培养小鼠睾丸间质细胞系(TM3细胞)，并将其分为四组，分别为对照组、PA(0.4mM)处理组、环孢素A(Cyclosporin A，CsA)(1uM)处理组及PA+CsA处理组（浓度同前）。处理24小时后，采用Western Blot analysis、RT-PCR法观察StAR及CypD表达量的变化;MitoSOX Red染色检测线粒体ROS含量的变化;JC-1试剂盒检测线粒体膜电位(ΔΨm)的改变;提取细胞线粒体检测线粒体ATP含量的变化;MDA试剂盒检测线粒体脂质过氧化程度。
　　结果:①PA能够在蛋白水平及mRNA水平抑制StAR的表达。②PA刺激可上调CypD的表达，并且引起线粒体结构及功能损伤，表现为线粒体内产生的ROS增多，ATP减少，线粒体跨膜电位降低，以及脂质过氧化增加。③在PA+CsA组线粒体应激损伤较PA处理组有所缓解。④PA+CsA组StAR表达较PA处理组上调。
　　结论:PA可能通过CypD介导的线粒体应激下调睾酮合成关键蛋白StAR的表达。

目录

声明

摘要

符号说明

2型糖尿病男性患者血清睾酮水平低下对非酒精性脂肪肝的影响

前言

对象与方法

结果

讨论

结论

附录

参考文献

棕榈酸通过CypD介导的线粒体应激抑制StAR的表达

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

附录

参考文献

致谢

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