过表达miR-302诱导结肠癌细胞促炎水平升高、线粒体氧化应激并抑制裸鼠成瘤的研究

摘要

目的 探讨过表达miR-302对结肠癌(CC)细胞促炎水平、线粒体氧化应激水平及对裸鼠成瘤的影响.方法 将CC细胞SW480随机分成空白对照组(Control组)、阴性对照组(miR-NC组)、过表达组(miR-302 mimic组);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-302表达量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测促炎因子水平[白细胞介素(IL)-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)];qRT-PCR检测促炎因子mRNA表达[IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α];流式检测线粒体膜电位变化;试剂盒检测氧化应激标记物水平[丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)];Western blot法检测线粒体损伤相关蛋白表达B细胞淋巴瘤-2(Bcl2)相关X与Bcl2的比值(Bax/Bc12)、裂解型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3与 Caspase3的比值(Cleaved cas3/cas3)以及 c-Myc;建立裸鼠移植瘤模型检测肿瘤组织质量;免疫组化检测caspase 3阳性表达量.结果 与miR-NC组相比,miR-302 mimic组miR-302表达量、促炎因子水平(IL-6、iNOS、IL-1β mRNA、TNF-α mRNA)、氧化应激标记物水平(MDA、LDH)、线粒体损伤相关蛋白表达(Bax/Bcl2、Cleaved cas3/cas3)及肿瘤组织 caspase 3阳性表达量均明显升高(P＜0.05);与miR-NC组相比,miR-302 mimic组线粒体膜电位、c-Myc表达量、肿瘤组织质量均降低(P＜0.05).结论 过表达miR-302诱导CC细胞炎症因子水平升高、线粒体氧化应激并抑制裸鼠成瘤.