多巴胺受体蛋白在APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠海马中的表达差异及意义

摘要

研究目的:
　　分析APP/PS1阿尔茨海默病小鼠模型海马中多巴胺受体蛋白(Dopamine Receptor，DR)的表达差异，探究多巴胺受体表达与阿尔茨海默病发病机制之间的关系，并探讨其作为阿尔茨海默病诊断以及治疗靶点的可能性，为诊断、治疗阿尔茨海默病提供新思路。
　　研究方法:
　　1.选取APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's diseases，AD)模型和野生型小鼠各24只，分别为4月龄雌鼠6只，4月龄雄鼠6只，8月龄雌鼠6只，8月龄雄鼠6只，提取小鼠的海马蛋白，之后免疫蛋白印迹(Western Blot)实验;选取转基因小鼠12只，其中4月龄雌鼠4只、雄鼠3只，8月龄雌鼠3只、雄鼠2只;野生型小鼠18只，其中4月龄雌鼠4只、雄鼠4只，8月龄雌鼠4只、雄鼠6只，提取海马，行membrane blot;
　　2.选取APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's diseases，AD)模型小鼠4月龄12只（其中雌鼠7只，雄鼠5只），8月龄10只（其中雌鼠6只，雄鼠4只）;野生型小鼠4月龄12只（其中雌鼠6只，雄鼠6只），8月龄8只（其中雌鼠4只，雄鼠4只），提取小鼠海马mRNA，行实时定量荧光PCR(qPCR);
　　3.取两种基因型各16只小鼠右侧半脑的石蜡切片，其中4月龄雌雄各4只，8月龄雌雄各4只，进行免疫组织化学染色(IHC);
　　4.运用t检验对Western Blot、qPCR以及免疫组化结果进行统计分析，探究阿尔茨海默病小鼠与C57小鼠海马中多巴胺受体mRNA和蛋白的表达差异。
　　研究结果:
　　1.mRNA水平发现8月龄阿尔茨海默病模型雌鼠较野生型雌鼠D1受体表达增加，而8月龄雄鼠、4月龄转基因和野生型小鼠并未发现差异;8月龄阿尔茨海默病转基因模型小鼠与野生型小鼠D1受体与D2受体比值出现差异，APP/PS1小鼠较野生型小鼠比值增加，海马的CA1区免疫组化染色有增加趋势。
　　2.蛋白表达水平发现4月龄阿尔茨海默病模型雌鼠D1受体在CA1区表达较同月龄野生型雌鼠增多，且有统计学差异。
　　3.D2受体在阿尔茨海默病模型小鼠和野生型小鼠中mRNA水平和蛋白表达水平均无明显差异。
　　4.Aβ染色发现4月龄阿尔茨海默病模型雌鼠与雄鼠在海马和皮层均有明显差异，而8月龄阿尔茨海默病模型小鼠雌雄仅在皮层中存在差异，海马中未表现出明显差异。
　　研究结论:
　　1.8月龄雌性转基因小鼠D1受体mRNA水平较野生型小鼠增加，D1/D2比值较野生型小鼠增加，其海马CA1区IHC染色也有增加趋势。
　　2.4月龄与8月龄阿尔茨海默病模型小鼠D2受体表达在mRNA和蛋白表达水平与对照组相比无明显差异。
　　3.具体机制有待进一步研究。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

1．对象与方法

1．1 研究对象

1．2 材料

1．3 方法

1．4 数据处理及分析

2．结果

2．1 在mRNA水平发现D1受体表达高于对照组，D2受体无明显差异

2．2 在蛋白水平发现D1受体出现差异表达趋势，D2受体无明显变化

2．3 在蛋白水平上Aβ斑块在两种基因型中分布有明显差异

3．讨论

结论

附表

附图

参考文献

综述 阿尔茨海默病海马中多巴胺受体的表达差异

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文及著作