声明
摘要
符号说明
第1章绪论
1．2． 人偏肺病毒临床感染疾病与检测方法
1．2．1． 人偏肺病毒感染的症状和流行概况
1．2．2． 人偏肺病毒临床样本分离培养特点
1．2．3． 检测方法
1．3． 人偏肺病毒全基因组测序和分型
1．4． 偏肺病毒的病毒学特征
1．4．1． 病毒的结构和基因组组成
1．4．2． 病毒的生命历程
1．4．3． 肺病毒科病毒的转录调控机制研究
1．5． 抗病毒药物和疫苗研究进展
1．5．1． 治疗药物
1．5．2． 疫苗研究
1．6． 课题立题的依据和意义
第2章偏肺病毒的分离培养与检测方法建立
前言
2．1． 材料和方法
2．1．1． 主要试剂
2．1．2．主要仪器
2．1．3． 样本来源
2．1．4． 病毒培养基中胰酶浓度优化
2．1．5． 偏肺病毒细胞适应性实验
2．1．6． 样本中人偏肺病毒的RT-PCR检测
2．1．7． 病毒M基因真核表达载体构建
2．1．8． 偏肺病毒M基因在LLCMK2细胞中的瞬时表达与IFA实验
2．2． 结果
2．2．1． 建立偏肺病毒的RT-PCR检测方法
2．2．2． RT-PCR法检测样本中的偏肺病毒
2．2．3． 培养基中添加不同浓度胰酶对细胞生长的影响
2．2．4． 偏肺病毒的细胞适应性实验
2．2．5． 偏肺病毒GZ201601传代PCR鉴定结果
2．2．6．M蛋白真核表达质粒的构建
2．2．7． 间接免疫荧光法检测病毒M基因在细胞中的表达
2．3． 讨论
第3章偏肺病毒的基因分型和全基因组测序
前言
3．1． 材料和方法
3．1．1． 样本来源
3．1．2．试剂耗材
3．1．3．主要仪器
3．1．4． G基因扩增和测序
3．1．5． 序列比对和进化树建立
3．1．6． 偏肺病毒全基因组测序
3．2． 结果
3．2．1． 样本中人偏肺病毒G基因的PCR扩增
3．2．2． G基因比对和进化树建立
3．2．3． GZ201601培养物的全基因组测序
3．3． 讨论
第4章偏肺病毒双顺反子微基因组构建
前言
4．1． 材料和方法
4．1．1． 主要试剂
4．1．2．主要仪器
4．1．3 基因PCR扩增和载体构建
4．1．4． 转染BSRT7／5细胞
4．1．5． 三种报告基因检测
4．2． 结果
4．2．1． 双顺反子的微基因组中上游报告基因转录效率分析
4．2．2． 双顺反子中下游报告基因转录效率分析
4．3． 讨论
参考文献
致谢
