谷氨酰半胱氨酸连接酶在类风湿性关节炎中基因表达变化的研究

摘要

目的：类风湿性关节炎是一种常见的慢性自身免疫性关节疾病，其致病原因及病理过程一直是研究热点。为研究氧化应激状态特别是谷氨酰半胱氨酸连接酶对类风湿性关节炎疾病过程的影响，我们采用适当方法对谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位和调节亚单位在类风湿性关节炎患者体内的改变进行分析，以说明氧化应激在类风湿性关节炎发病中的意义。
　　方法：采集类风湿性关节炎患者及健康对照清晨空腹静脉血，采用免疫比浊法检测RF、CRP、C3、C4、IgG、IgA、IgM，仪器法检测血沉，ELISA法检测抗CCP抗体；使用Ficoll Hypaque淋巴细胞分层液密度梯度离心分离外周血单个核细胞，提取外周血淋巴细胞 RNA，反转录，采用实时荧光定量 PCR对谷氨酰半胱氨酸连接酶的催化亚基和调节亚基的基因表达水平进行分析，以溶解曲线验证实时荧光定量PCR实验扩增特异性。
　　结果：类风湿性关节炎患者组实验室数据表现，抗CCP抗体、RF、CRP、血沉升高，C4降低，IgG升高。与对照组相比较，类风湿性关节炎病人外周血淋巴细胞中的谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基基因和调节亚基基因表达明显下降（谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基基因：RA组1±0.018，对照组3.62±0.429；p＜0.01。谷氨酰半胱氨酸连接酶调节亚基基因：RA组1±0.03，对照组2.97±0.467；p＜0.01)。
　　结论：谷氨酰半胱氨酸连接酶的催化亚基和调节亚基在类风湿性关节炎病人的疾病过程中发生明显的改变，其基因表达水平明显下降，说明谷胱甘肽代谢及机体的氧化应激状态可能在类风湿性关节炎的疾病过程中扮演重要的角色，并可将其作为研究类风湿性关节炎治疗的一个方向。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

目录

引言

第1章 材料和方法

1 实验材料

2实验方法

第2章 结果

1. RA病人和对照组实验室指标分析结果

2. RA病人外周血淋巴细胞中GCLc和GCLm基因表达分析

第3章 讨论

结论

参考文献

综述: 基因、环境和氧化应激在类风湿性关节炎病因及疾病

攻读学位期间的研究成果

致谢

声明