神经调节素1β对大鼠脑缺血再灌注损伤后HPK1的影响

摘要

目的：缺血性脑卒中是一种复杂的神经系统疾病，可导致脑组织的不可逆性坏死。本研究旨在探讨神经调节素1β（neuregulin1β，NRG1β）对大鼠脑缺血再灌注（middle cerebral artery occlusion/reperfusion，MCAO）损伤后造血祖细胞激酶1（hematopoietic progenitor kinase1，HPK1）表达的影响和意义。 方法：成年健康雄性Wistar大鼠70只，体质量240～270g，随机分为3组，假手术组、模型组、NRG1β治疗组。采用改良Longa法制备大鼠脑缺血2h再灌注24h模型，用激光多普勒血流仪监测实验动物大脑中动脉供血区的血流变化，当插入线栓后局部脑血流量平稳降到插线前的30%及以下，拔出线栓后脑血流量恢复至插线前的80%及以上作为动物纳入标准。改良神经功能缺损评分（modified neurological severity score，mNSS）评价神经行为功能，干湿称重法测定脑含水量，苏木精伊红（hematoxylin-eosin，H&E）染色检测神经细胞病理形态，尼氏（Nissl）染色检测神经元的形态变化，原位末端标记法（in situ cell death，TUNEL）染色检测神经细胞凋亡，荧光法测定血脑屏障（blood brain barrier，BBB）伊文斯兰（Evans Blue，EB）的渗漏率，免疫组化染色和免疫印迹检测HPK1表达水平。 结果：与假手术组相比，模型组大鼠mNSS评分升高，脑含水量升高，神经细胞排列异常，神经元形态结构改变，凋亡细胞数增多，伊文斯兰的渗漏率增多，p-HPK1蛋白表达增强（P＜0.05）。与模型组相比，NRG1β治疗后大鼠神经行为功能改善，脑含水量明显下降，神经细胞的变性细胞数减少，神经元的异常形态结构改善，凋亡细胞数减少，血脑屏障得到改善，同时大鼠脑缺血再灌注损伤后HPK1的表达受到抑制（P＜0.05）。 结论：NRG1β对大鼠脑缺血再灌注后损伤有神经保护作用，可能与其抑制HPK1表达有关。