穿心莲内酯在人体内的代谢产物研究

摘要

穿心莲内酯,化学名为:3-[2-[decahydro-6-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-5,8a-dimethyl-2-methylene-1-napthalenyl]ethylidene]dihydro-4-hydroxyl-2(3H)-Furanone,是中药穿心莲[Andrographispaniculate(Burm)Nees]中的主要活性成分之一,具有抗炎、抗菌、抗血小板聚集、保肝、诱导细胞分化、抗艾滋病及抗癌等多方面的药理活性,临床上广泛应用于肠道感染、呼吸道感染等疾病的治疗,但关于它体内代谢情况的研究报道不多.该室在穿心莲内酯大鼠体内的代谢产物研究中,得到了多种新的代谢产物,而且其中一个代谢产物,14-脱羟-12-磺酸基穿心莲内酯,恰巧是临床常用的抗炎注射剂莲必治的主要成分.为了进一步了解穿心莲内酯在人体内的代谢转化情况,为新药研究和临床用药提供依据,我们又深入进行了穿心莲内酯在人体内代谢产物的研究工作.利用现代色谱分离手段,从人尿液样品中共分离得到了23个穿心莲内酯的代谢产物,通过化学、波谱学等手段确定了其中18个代谢产物的结构.这18个代谢产物均为首次发现的穿心莲内酯的代谢产物,同时也全部都是未见文献报道的新化合物.根据质谱谱图和碳谱数据,又推测了另外2个微量代谢产物的结构.该研究发现了两个新的代谢反应:底物与肌酸酐和肼的结合反应.研究中还发现了一个罕见的代谢反应:底物与脲的结合反应.在代谢研究中,与脲结合的代谢反应十分少见,仅有几篇相关文献进行了报道.推测上述代谢反应的机理为:带有孤对电子的氮原子或带有负电性的负碳离子亲核进攻α,β-不饱和羰基的β-碳原子,然后脱水,最终形成双键移位并与肌酸酐、肼及脲结合的代谢产物.上述新代谢反应和罕见代谢反应的发现丰富了药物代谢研究的理论知识.研究中发现,穿心莲内酯在人体和大鼠体内的代谢中存在较大的种属差异,在大鼠的体内代谢中,代谢产物主要以磺酸化和硫酸化产物为主,而在人体的代谢产物主要以葡萄糖醛酸、硫酸和脲的结合物为主.说明将动物的代谢资料和风险评价外推至人时,需要慎重对待.通过此项研究,阐明了穿心莲内酯在人体内的代谢产物和代谢途径,为该药的进一步开发利用和临床的合理应用提供了理论依据.

目录

缩略语一览表

第一章 前言

1.1药物代谢研究的内容及意义

1.2药物代谢的研究方法

1.2.1整体动物实验法

1.2.2体外实验法

1.2.3微生物转化法

1.3药物代谢的分析方法

1.3.1薄层色谱法

1.3.2气相色谱法

1.3.3液相色谱法及其联用分析法

1.3.4毛细管电泳法

1.3.5同位素示踪及相关技术

1.4药物代谢中的种属差异和种属相似

1.5穿心莲内酯的研究进展

1.5.1穿心莲内酯的理化性质

1.5.2穿心莲内酯的药理活性

1.5.3穿心莲内酯的药代动力学研究

第二章 穿心莲内酯代谢产物的结构鉴定

2.1化合物编号、名称和结构

2.2结构鉴定

1 代谢物 1

2 代谢物 2

3 代谢物 3

4 代谢物 4

5 代谢物 5

6 代谢物 6

7 代谢物 7

8 代谢物 8

9 代谢物 9

10 代谢物 10

11 代谢物11

12 代谢物 12

13 代谢物 13

14代谢物 14

15 代谢物 15

16 代谢物 16

17 代谢物 17

18代谢物18

19代谢物 19

20代谢物20

第三章 实验部分

3.1实验仪器与材料

3.2健康受试者尿样采集

3.3人体尿液样品中代谢产物的分离流程

3.4代谢产物结构鉴定数据

第四章 小结与讨论

参考文献

博士期间发表论文

致谢

APPENDIXES

APPENDIX1 The structures of metabolite to metabolite 19 of And rographolide in humans

APPENDIX2 The spectra of Andrographolide metabolites