藜芦生物活性成分和炮制机理研究及益母草化学成分研究

摘要

藜芦属(Veratrum Linn.)为百合科(Liliaceae)植物,根及根茎入药,有大毒。治疗中风痰壅、喉痹不通、癫痫、头痛、黄疸、疟疾、疥癣。现代毒理研究表明,藜芦对消化道黏膜、中枢神经系统、延脑迷走神经背核很强的刺激作用。
　　 根据中药炮制学,将藜芦(Veratrum Nigrum L.)根和根茎醋制。利用现代色谱手段从醋制藜芦的总碱部分分离得到11个化合物,非总碱部分分离得到3个化合物,通过化学和光谱学方法鉴定了11个化合物的结构,它们分别是:
　　 12β-hydroxylveratroylzygadenine(1)*,1β,3α-dihydroxy-5β-jervanin-12-en-11-one(2)*,neoverapatuline(3)*,veratramine(4),veratrosine(5),rubijervine(6),gadenine(7),jervine(8),veramarine(9),verdine(10),pseudojervine(11),resveratol(12),piceid(13),β-sitosterol(14)个化合物,其中化合物1,2,3为新化合物。
　　 利用现代色谱手段从黑紫藜芦[Veratrum japonicum(Baker)Loes.f.]的总碱部分分离得到6个化合物,通过化学和光谱学方法鉴定了5个化合物的结构,它们分别是:
　　 neogermine(15)*,germine(16),germerine(17),neogermbudine(18),veramitaline(19),其中化合物15为新化合物。
　　 建立了测定藜芦(Veratrum nigrum L.)醋制前后生物碱veratramine(9)含量的测定方法；比较了藜芦(Veratrum nigrum L.)醋制品水提物、米泔制品水提物、生品水提物及生品甲醇超声提取物中生物veratrosine(5)含量:比较了两种藜芦Veratrum nigrum L.和Veratrum japonicum(Baker)Loes.f.醋制前后藜芦醇(12)和虎杖苷(13)的含量差异。建立藜芦(Veratrum nigrum L.)生品甲醇-氯仿混合溶剂超声提取物、醋制品水提物、米泔制品水提物、生品水提物的中10种生物碱成分的含量测定研究。
　　 对所分离鉴定的部分化合物进行了体外细胞毒活性测试,药理模型有:HL-60人白血病癌细胞和SF188入神经胶质肿瘤细胞,结果显示:12β-hydroxylveratroylzygadenine(1),veramarine(9),veratroylzygadenine(7)对HL-60人白血病癌细胞有抑制作用。veratramine(4),rubijervine(6)对SF188人神经胶质肿瘤细胞有抑制作用。
　　 对藜芦(Veratrum nigrum L.)水提物和醋制藜芦(Veratrum nigrum L.)水提物进行急毒评价,试验结果表明藜芦水提物灌胃给小鼠的LD50(bliss法)为4.2g/kg,95％可信限为3.4～5.4g/kg；醋制藜芦水提物灌胃给小鼠的LD50(bliss法)为3.2g/kg,95％可信限为2.5～3.9g/kg。
　　 考察了黑紫藜芦[Vertrum japonicum(Baker)Loes.f.]水提物对小鼠自主活动的影响。结果表明黑紫藜芦[Vertrum japonicum(Baker)Loes.f.]在0.5-1.40g/kg范围内均具有中枢抑制作用,ED50=0.684 g/kg。
　　 利用单细胞凝胶电泳方法考察了黑紫藜芦[Veratrum japonicum(Baker)Loes.f.]水提物,总碱,neogermine(15),germine(16),germerine(17),neogermbudine(18)对小鼠小脑和皮层细胞DNA的影响。
　　 益母草(Leonurus heterophyllus Sweet)为唇形科益母草属植物一年或二年生草本,广泛分布于欧亚大陆温带。其味辛、微苦,具有活血调瘀、利尿消肿之功效。在临床上用于月经不调,产后瘀阻、心脑血管疾病、血液病等疾病的治疗。
　　 从益母草(Leonurus heterophyllus Sweet)地上部分的水提取物和醇提取物中,经溶剂分步萃取,大孔树脂,反复硅胶柱色谱,HPLC,PTLC,sephadex LH-20等方法得到14个化合物,通过理化常数测定和光谱数据分析等手段鉴定为:槲皮素-3-O-[3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酰氧基)-α-L-吡喃鼠李糖基]-(1→6)-O-β-D-吡喃半乳糖苷(heteronoside,20)*,芹菜素(apigenin,21),槲皮素(quercetin,22),山柰酚-3-O-β-D-[6-(4-羟基桂皮酰氧基)]吡喃葡萄糖苷(tiliroside,23),芦丁(24),槲皮素-3-O-β-D-(6-D-α-L-吡喃鼠李糖基)吡喃半乳糖苷(quercetin3-O-robinobioside,25),megstigmane(26),益母草碱(27),ajugoside(28),2,6-二甲基-2E,7-辛二烯-1,6-二醇(29),丁香酸(30),苯甲酸(31),β-谷甾醇(32),胡萝卜苷(33)。其中化合物20为新化合物,化合物25,26,29,30,31为首次从该属植物中分得。

目录

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缩略语一览表

第一部分 藜芦生物活性成分和炮制机理研究

第一章 藜芦属植物研究概况

1.1 藜芦属植物化学成分的研究

1.2 藜芦属植物的药理学研究

1.3 藜芦与诸参辛芍的配伍研究。

1.4 藜芦的毒性与毒理

1.5 炮制

1.6 结语

第二章 醋制藜芦(Vertrum Nigrum L.)化学成分研究

第一节 醋制藜芦(Vertrum Nigrum L.)的提取分离

第二节 化合物的结构鉴定

第三章 黑紫藜芦[Vertrum japonicum(Baker)Loes.f.]化学成分研究

第一节 黑紫藜芦[Vertrum japonicum(Baker)Loes.f.]的提取分离

第二节 化合物的结构鉴定

第四章 藜芦质量控制方法研究

4.1 白藜芦醇、虎杖苷的含量测定

4.2 生物碱藜芦胺(veratramine)的含量测定

4.3 生物碱藜芦新碱(veratrosine)的含量测定

4.4 藜芦的HPLC-ELSD10个生物碱的含量测定研究

第五章 活性和毒性测试

5.1 细胞毒活性评价

5.2 毒性评价

第六章 实验部分

6.1 实验仪器与材料

6.2 药理部分实验材料与仪器

6.3 结构鉴定数据

第七章 小结与讨论

7.1 藜芦(Veratrum nigrum L.)

7.2 黑紫藜芦[V.japonicum(Baker)Loes.F.]

参考文献

第二部分 益母草化学成分研究

第八章 益母草属植物研究概况

8.1 性状及代用品的研究

8.2 益母草的化学成分研究

8.3 益母革的药理作用

8.4 益母草的临床应用

8.5 结语

第九章 益母草化学成分的研究

第一节 益母草的提取分离

第二节 化合物的结构鉴定

第十章 实验部分

10.1 实验仪器与材料

10.2 结构鉴定数据

第十一章 总结与讨论

参考文献

致谢

个人简历

附录

附图