冬凌草甲素通过抑制IGF-1受体信号转导途径诱导人恶性黑色素瘤A375-S2细胞死亡

摘要

本实验室以前的研究表明，冬凌草甲素(oridonin)能诱导人恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡。本文考察了oridonin在诱导A375-S2细胞凋亡时，可能潜在的对胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号转导途径的抑制机制。IGF-1R是一种跨膜的受体型酪氨酸激酶，IGF-1R的激活具有拮抗凋亡和促进存活的作用。我们发现，IGF-1可以拮抗20 μM oridonin诱导的A375-S2细胞凋亡，而不能拮抗40 μM oridonin(IC<,50> at 24 h)诱导的A375-S2细胞凋亡；IGF-1介导的保护作用依赖于Ras癌基因蛋白或p38 MAPK(p38 mitogen activated protein kinase)的活化，而P13K(phosphatidylinositol-3-OH kinase)或ERK(extracellular signal-regulated kinase)的活性对IGF-1的保护作用没有明显影响；Oridonin能剂量依赖性地下调A375-S2细胞IGF-1R的表达，抑制磷酸化p38 MAPK的水平。因此，oridonin对IGF-1R信号途径的抑制与其凋亡诱导作用有关。研究发现，在oridonin的促凋亡信号途径和IGF-1R的抗凋亡途径中，p53蛋白起着重要的调节作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 绪论

第一节 胰岛素样生长因子-1及其受体信号转导通路

一 蛋白酪氨酸激酶——抗肿瘤药物的新靶点

二 胰岛素样生长因子-1及其受体

三 IGFs系统与肿瘤

四IGF-1R下游信号转导途径

第二节 冬凌草甲素诱导恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的研究进展

一 恶性黑色素瘤的研究进展

二 冬凌草甲素诱导恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的研究进展

参考文献

第二章 冬凌草甲素通过抑制IGF-1R的表达诱导A375-S2细胞死亡

实验材料与方法

1. 实验材料

2. 实验方法

实验结果

1. 酪氨酸激酶对A375-S2细胞具有保护作用

2. IGF-1对A375-S2细胞的促增殖作用

3. IGF-1能够拮抗20μM oridonin诱导的A375-S2细胞死亡

4. IGF-1拮抗genistein诱导的A375-S2细胞死亡

5. A375-S2细胞的存活依赖于IGF-1受体的活性

6. oridonin剂量依赖性地下调IGF-1R表达

讨论

参考文献

第三章 冬凌草甲素抑制IGF-1R下游信号途径的机制研究

实验结果

1. IGF-1的保护作用依赖Ras激酶的活性

2. IGF-1的保护作用依赖p38MAPK激酶的活性

3. 免疫印迹法考察oridonin对p38MAPK抑制作用

讨论

参考文献

第四章 IGF-1R信号转导与凋亡信号转导之间的相互作用机制

实验结果

1. IGF-1不能拮抗Fas激动性抗体CH11诱导的A375-S2细胞死亡

2. IGF-1拮抗UV诱导的A375-S2细胞死亡

3. IGF-1抑制20μM oridonin诱导的p53上调

4. oridonin诱导IGF-1R下调依赖p53活性

讨论

参考文献

第五章 总结与展望

致谢