Aspergillus versicolor D-1立体选择性还原两种倍半萜内酯的研究

摘要

生物催化由于其环境友好，反应条件温和、高效、区域和立体选择性强等特点，其应用范围越加广泛，尤其在酶的不对称还原方面，与化学合成方法相比，优势很明显。倍半萜内酯类化合物由于具有显著的抗炎，抗肿瘤，抗菌等药理活性，已受到人们的普遍关注。对倍半萜内酯类化合物的生物转化也逐渐成为人们研究的热点，人们期望从中获得新活性或活性增强的化合物。 本文利用采用HPLC分析方法，从八株丝状真菌中筛选出一株真菌AspergillusversicolorD-1能够转化倍半萜内酯类化合物3-羟基1(10)，3，11(13)-愈创木三烯-12，6-内酯-2-酮(简称HGT)，通过A．versicolorD-1的生长细胞与静息细胞转化HGT的实验，发现其生长细胞和静息细胞的转化结果有所差异。光谱数据分析的结果表明，在生长细胞的作用下，转化产物单一，为(5S，6S，7S，11S)-3-羟基-1(10)，3-愈创木二烯-12，6-内酯-2-酮(简称HGD1)；在静息细胞的作用下，转化产物为一对差向异构体，同时考察了生长细胞转化HGT的动态过程。 在上述实验的基础上，进一步考察A．versicolorD-1对不同化合物的转化能力，实验结果表明，A．versicolorD-1能够立体选择性还原另一种倍半萜内酯类化合物即去氢木香内酯，通过生长细胞与静息细胞的转化结果对比，最终选择利用静息细胞转化去氢木香内酯，转化产物为11β，13-二氢去氢木香内酯，转化率为98％。同时优化了静息细胞转化的条件，最终确定了A．versicolorD-1静息细胞转化的最佳初始pH为7.0，温度28℃，底物加入的最大浓度为304mg/L。

目录

文摘

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声明

第一章前言

1.1生物催化与手性技术简介

1.2生物催化的不对称氧化还原

1.3倍半萜内酯化合物的药理作用

1.4HGT的研究简介

1.5木香的研究概况

1.6立题背景和意义

第二章A.versicolor D-1不对称还原HGT的研究

2.1实验材料

2.1.1菌株

2.1.2药品

2.1.3试剂

2.1.4培养基

2.1.5仪器和设备

2.2实验方法

2.2.1转化HGT的菌株筛选实验

2.2.2 A.versicolor D-1生长细胞和静息细胞转化HGT的比较

2.2.3样品分析方法

2.2.4转化产物的制备

2.2.5标准曲线的绘制

2.2.6生长细胞转化HGT的动态过程

2.3实验结果

2.3.1转化HGT的菌株筛选试验

2.3.2生长细胞和静息细胞转化HGT的比较

2.3.3转化产物的结构鉴定

2.3.4生长细胞转化HGT的动态过程

2.4小结

第三章A.versicolor D-1选择性还原去氢木香内酯的研究

3.1实验材料

3.1.1菌株

3.1.2药品

3.1.3试剂

3.1.4培养基

3.1.5仪器和设备

3.2实验方法

3.2.1化合物筛选试验

3.2.2去氢木香内酯和木香烃内酯的分离方法

3.2.3 A.versicolorr D-1转化去氢木香内酯的实验考察

3.2.4去氢木香内酯转化产物的制备

3.2.5样品分析方法

3.3实验结果

3.3.1化合物筛选实验

3.3.2转化产物的结构鉴定

3.4小结

第四章A.versicolor D-1静息细胞转化去氢木香内酯条件的优化

4.1实验材料

4.1.1菌株

4.1.2药品与试剂

4.1.3培养基

4.1.4仪器和设备

4.2实验方法

4.2.1标准曲线的绘制

4.2.2菌丝体的制备

4.2.3样品分析方法

4.2.4静息细胞与生长细胞转化去氢木香内酯的比较

4.2.5初始pH值对静息细胞转化的影响

4.2.6温度对静息细胞转化的影响

4.2.7去氢木香内酯的浓度对静息细胞转化的影响

4.3实验结果

4.3.1静息细胞与生长细胞转化去氢木香内酯的比较

4.3.2初始pH值对静息细胞转化的影响

4.3.3温度对静息细胞转化的影响

4.3.4去氢木香内酯浓度对静息细胞转化的影响

4.4小结

第五章结论

附图

参考文献

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