胡萝卜种质资源遗传多样性研究及品种、杂交种鉴定

摘要

胡萝卜是世界上最为重要的蔬菜作物之一，因其产量高，富含β-胡萝卜素，耐贮运，深受人们的喜爱。我国是胡萝卜生产大国，胡萝卜种质资源十分丰富，开展胡萝卜种质资源遗传多样性的研究，有利于胡萝卜种质资源的收集、保存、鉴定、创新和有效利用。由于RAPD技术具有快速、简便、高效等优点，这一技术被广泛应用于遗传多样性研究、品种(系)指纹图谱构建以及杂交种纯度鉴定。本研究采用了RAPD标记，结合系统聚类分析，对34份胡萝卜种质资源的遗传多样性和亲缘关系进行了研究。首次在国内采用RAPD标记构建了胡萝卜指纹图谱，并对胡萝卜杂交种金红四号进行了杂交种鉴定。主要研究结果如下： 1.本实验使用20条随机引物对34份胡萝卜种质资源材料进行RAPD遗传多样性分析的研究，共检测到胡萝卜的139个基因位点，其中40条为相同带，99条为特异带，多态性位点的百分率为76.74％。根据Jaccard系数求得34个样品间的遗传距离，并建立矩阵，利用UPGMA聚类法进行聚类分析。结果表明，以0.51为截值时，34份材料可聚为5类，8个亚类。 2.使用40条随机引物对15个胡萝卜品种DNA池同时扩增，经过筛选，引物S127，S140可以产生条带清晰的谱带，将15个供试品种区分开。经过反复多次实验；扩增结果稳定，特异性明显，能够稳定标记供试的15个胡萝卜品种混合DNA的差异性，构建了以上15个品种的指纹图谱。 3.从40条随机引物中筛选出4条引物(S107，S114，S115，S126)能够鉴定“金红四号”杂交种及其亲本。经反复多次实验，扩增结果稳定，特异性明显，可用于胡萝卜杂交种纯度鉴定。其中引物S115所扩增的母本与杂交种的条带一致，其与父本之间的差异条带很可能与pt型不育的控制基因有关，对此尚需进一步的研究。

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论文说明:缩略语表

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第一章引言

1胡萝卜研究进展

1.1胡萝卜的起源与分类

1.2胡萝卜的分布与生产

1.3胡萝卜种质资源概况

2 DNA分子标记技术原理与方法

2.1 RAPD标记

2.2 RFLP标记

2.3 SSR标记

2.4 AFLP标记

2.5 SCAR标记

2.6 SNP标记

3 DNA分子技术辅助作物育种研究进展

3.1构建分子遗传图谱

3.2亲缘关系和遗传多样性研究

3.3品种(系)指纹图谱构建及杂种纯度鉴定

3.4基因定位和分子标记辅助选择

4本研究的目的和意义

第二章胡萝卜种质资源遗传多样性分析

1材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2结果与分析

2.1提取的胡萝卜总DNA浓度与质量检测分析

2.2 PCR扩增结果

2.3胡萝卜的聚类分析

3讨论

3.1 RAPD标记对胡萝卜遗传多样性研究的有效性分析

3.2胡萝卜的起源与传播

3.3胡萝卜的亲缘关系与分类

3.4遗传多样性研究的必要性

4结论

第三章胡萝卜指纹图谱构建及杂种纯度鉴定

1材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2结果与分析

2.1提取的胡萝卜总DNA的浓度与质量检测分析

2.2供试品种特异性引物筛选

2.3筛选随机引物在胡萝卜品种特异性引物的PCR扩增结果

3讨论

3.1胡萝卜指纹图谱构建

3.2胡萝卜杂交种纯度鉴定

3.3特异性谱带的代表性

4结论

致谢

参考文献

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