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【6h】

乳源性金黄色葡萄球菌耐药及产肠毒素特性研究

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声明

1引言

1.1金黄色葡萄球菌

1.1.1生物学特性

1.1.2金黄色葡萄球菌的致病性

1.1.3金黄色葡萄球菌分型

1.1.4抵抗力

1.1.5金黄色葡萄球菌肠毒素中毒

1.1.6金黄色葡萄球菌的检测

1.1.7食品中金黄色葡萄球菌的生长与生态

1.2金黄色葡萄球菌与食品安全

1.3金黄色葡萄球菌耐药性的研究进展

1.3.1细菌的耐药性

1.3.2细菌耐药机制

1.3.3金黄色葡萄球菌对抗生素的药物敏感性

1.4金黄色葡萄球菌肠毒素

1.4.1金黄色葡萄球菌肠毒素的分子组成

1.4.2金黄色葡萄球菌肠毒素的理化性质

1.4.3金黄色葡萄球菌肠毒素的检测

1.5本课题研究的目的、内容及意义

2材料与方法

2.1材料

2.1.1样品采集

2.1.2培养基

2.1.3标准菌株

2.1.4试验试剂

2.1.4标准品抗生素

2.1.5特克瑞葡萄球菌肠毒素分型试剂盒

2.1.6仪器设备

2.2试验方法

2.2.1采样

2.2.2培养基

2.2.3金黄色葡萄球菌的分离、鉴定与保存

2.2.4生理生化鉴定试验及方法

2.2.5金黄色葡萄球菌的药敏性试验

2.2.6金黄色葡萄球菌肠毒素的提取及分型鉴定

3.试验结果与分析

3.1形态

3.2培养特征

3.3金黄色葡萄球菌生理生化反应

3.4耐药性金黄色葡萄球菌的分离筛选

3.5抗生素最低抑菌浓度测定

3.6金黄色葡萄球菌对特定抗生素敏感性测定

3.7金黄色葡萄球菌对各抗生素的敏感性结果

3.8肠毒素的提取

3.9肠毒素含量的测定

3.9.1标准曲线的绘制

3.9.2提取液中肠毒素含量

3.9.3 SA23的生长曲线测定结果

3.10肠毒素分型

4、讨论

5.结论

致谢

参考文献

附表

附录

作者简介

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摘要

对呼和浩特郊区5家牧场鲜乳进行采样,共得到75个样品,并对乳样中金黄色葡萄球菌进行分离、鉴定和药敏性试验研究,同时对相对耐药的金黄色葡萄球菌进行肠毒素的提取,含量测定及分型鉴定。 结果表明:从75份样品中分离鉴定出25株金黄色葡萄球菌经纸片法初筛得到10株相对耐红霉素、链霉素、青霉素、氨苄西林的菌株,并对这10株茵进行了10种抗生素(Amikacin、Ciprofloxacin、Penicillin、Erythromycin、Cephazolin、Ofloxacin、Streptomycin、Ampicillin、CefotaximeSodiium、Sulfame)的敏感性试验,得出菌株SAl8,SA20,SA25对氧氟沙星中度敏感:菌株SA5,SAl8对环丙沙星中度敏感,菌株SA2对头孢唑林中度敏感,菌株SA。菌株对头孢噻肟钠具有抗性,其余菌株均对头孢类抗生素敏感。对其余所选抗生素表现出一定的耐性。同时利用国标规定GB/T4789-10-94方法对10株金黄色葡萄球菌肠毒素进行提取、含量测定、以及分型研究,通过计算最后确定十株金黄色葡萄球菌提取液肠毒素含量分别为33.28mg/mL、33.2mg/mL、35.63 mg/mL、35.57 mg/mL、39.57 mg/mL、39.9 mg/mL、30.95mg/mL、31.4 mg/mL、42.8 mg/mL、37.87 mg/mL。分离鉴定的10株金黄色葡萄球菌中,只有一株产生一种肠毒素,占lO%(1/10);产生2种肠毒素的菌株有7株,占70%(7/10);产生3种肠毒素的菌株有2株,占20%(1/5);其中产生A型肠毒素的菌株有4株:占40%(2/5);产生B型肠毒素的菌株有3株,占30%(3/10);产生C型肠毒素的菌株有5株,占50%(1/2);产生D型肠毒素的菌株有4株,占40%(2/5);产生E型肠毒素的菌株有3株,占30%(3/10),最后对肠毒素含量最高的SA23菌株进行生长曲线的测定,测定在18h时为对数生长期。

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