小麦籽粒中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及镰刀菌菌丝分布研究

摘要

本研究对人工接种禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)的两个小麦品种(M5和T4)籽粒中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇及镰刀菌菌丝分布进行了研究。采用盆栽试验，将以上两种对赤霉病(Fusarium head blight)感病的小麦品种栽培在11升的盆内。生长期25(GS 25)后定期施肥，在生长期31(GS 31)，剪去所有的分蘖苗，只留下主苗。在小麦扬花中期(GS 65)用3×105个孢子/毫升的禾谷镰刀菌孢子悬浮液进行喷雾接种。接种后7、14、21天分别取样，采用标准DON毒素分离法(SOP)分离游离的DON毒素、DON全毒素分离法(SP)分离游离和结合的DON毒素。同时在籽粒成熟的晚期取样，用电镜观察菌丝在籽粒内的分布规律。结果表明: 1.本研究采用的方法，DON毒素分离效果好，检测灵敏度高，回收率在82.93％～90.61％之间，相对标准偏差在2.32％～3.07％之间，检测限为0.135μg/g。 2.电镜观察到两种供试小麦籽粒表皮内外侧附着有大量的禾谷镰刀菌菌丝，有由外层逐渐向内层侵入的趋势。 3.对禾谷镰刀菌接种后游离和结合的DON毒素在对赤霉病感病的小麦籽粒内的变化进行研究，通过SP法在接种后第7天便检测到结合态DON毒素。 4.小麦籽粒接种第7天、第14天、第21天时，M5、T4籽粒中结合态DON毒素，分别占各自总DON毒素含量的56.48％、54.52％、56.48％和45.31％、32.51％、32.12％。 5.小麦籽粒接种后前三周，M5、T4籽粒中总DON毒素、游离态DON毒素、结合态DON毒素均逐渐增多。脱氧雪腐镰刀菌烯醇

目录

文摘

英文文摘

论文说明:插图及附表清单、缩略词表

声明

1引言

1.1脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)概述

1.1.1 DON的发现

1.1.2 DON的产生及理化性质

1.1.3 DON的毒性

1.1.4 DON对粮谷及粮谷类食品的污染

1.1.5 DON的限量标准

1.1.6 DON的膳食暴露及其危险性评估

1.2赤霉病及其与DON关系

1.2.1赤霉病概况

1.2.2小麦赤霉病与DON关系

1.3 DON的检测

1.3.1物理和化学检测

1.3.2免疫学检测

1.3.3生物学检测

1.4扫描电子显微镜概况

1.5食品安全检测技术发展概况

1.6本研究的目的意义及创新点

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1主要仪器和设备

2.1.2主要试剂

2.1.3主要试剂配制

2.1.4主要培养基制备

2.1.5试验器具的处理与准备

2.2试验方法

2.2.1小麦的栽培

2.2.2禾谷镰刀菌培养

2.2.3禾谷镰刀菌接种

2.2.4采样

2.2.5感病品种小麦籽粒菌丝分布电镜观察

2.2.6高效液相分析条件选择

2.2.7 DON毒素萃取

2.2.8 DON毒素测定

2.2.9标准曲线的建立与检测限

2.2.10高效液相分析验证

2.2.11数据处理

3结果与分析

3.1小麦样品栽培

3.2禾谷镰刀菌生长观察

3.3感病品种小麦籽粒菌丝分布电镜观察结果

3.4标准曲线、检测限的确定

3.5液相分析验证

3.5.1回收率试验

3.5.2精密度试验

3.6 DON检测方法评价

3.7结合态DON的初次检测

3.8接种第7天DON的测定

3.9接种第14天DON的测定

3.10接种第21天DON的测定

3.11两种小麦籽粒中游离态DON含量比较

3.12两种小麦籽粒中结合态DON含量比较

3.13两种小麦籽粒中总DON含量比较

4讨论

5结论

致谢

参考文献

作者简介