地塞米松致大鼠肝脏损伤中肝脏miRNA变化的研究

摘要

目的：旨在研究地塞米松导致的大鼠肝脏损伤中肝组织miRNA表达量的变化。
　　方法：将Wistar大鼠随机分为两组：空白对照组（CON组，n=8），皮下注射生理盐水0.2 ml；地塞米松诱导肝损伤模型组（DEX组，n=8），皮下注射地塞米松磷酸钠注射液，2.4 mg/kg。连续注射7天后，禁食不禁水24h，处死大鼠，测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、血糖（GLU）及甘油三酯（TG）水平，测定肝脏组织超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽（GSH）含量。通过 HE染色观察肝脏病理学变化。
　　结果：⑴ DEX组大鼠血清的ALT、AST、TG水平均显著增高，GLU水平显著降低；⑵组织切片显示，与对照组（CON）大鼠相比，注射地塞米松后大鼠肝脏细胞发生了变性；⑶通过miRNA测序分析发现，rno-miR-21-5p、rno-miR-215、rno-miR-29b-5p、 rno-miR-499-5p、 rno-miR-34a-5p、 rno-miR-203b-5p、rno-miR-100-3p、rno-miR-676、rno-miR-378a-3p和一个未知的miRNA表达量显著增高， rno-miR-672-3p、rno-miR-146a-3p、rno-miR-122-5p、rno-miR-205、rno-let-7b-5p和rno-miR-146b-3p表达量显著降低；poly(A) RT-qPCR检测验证了rno-miR-205、rno-let-7b-5p、rno-miR-672-3p表达量降低和 rno-miR-29b-5p、rno-miR-34a-5p、rno-miR-676表达量增高的趋势；⑷通过对差异表达 miRNA进行靶基因预测和功能注释，推测到差异表达miRNA相关的生物学功能。
　　结论：注射地塞米松造成了大鼠肝脏细胞发生变性，大鼠肝组织miRNA表达发生显著变化，差异表达的miRNA与不同的生物学功能相关。

目录

缩 略 语 表

1 引言

1.1 地塞米松

1.2 miRNA

1.3 药物性肝损伤的分子生物学机制

1.4 本课题的主要内容和研究意义

2 实验材料

2.1 实验动物及饲料

2.2 主要仪器与试剂

3 试验方法及步骤

3.1 试验分组及处理

3.2 样品采集

3.3 试验方法

3.4 统计学处理

4 结果分析

4.1 肝功能检测结果

4.2 大鼠肝组织匀浆脂质过氧化的测定

4.3 HE染色检测肝组织病变

4.4 miRNA测序分析结果

4.5 差异表达miRNA检测结果

4.6 miRNA靶基因信息分析结果

5 讨论

5.1 地塞米松肝损伤模型构建成功

5.2 地塞米松造成的肝损伤会影响大鼠肝脏miRNA的表达

5.3 地塞米松造成表达量变化的肝脏miRNA与多种生物学过程有关

6 结论

致谢

参考文献

作 者 简 介