山药块茎多糖生物活性及其机理的研究

摘要

本试验拟从山药粗多糖抗氧化性、果蝇生理特性、果蝇体内抗氧化活性、抑菌效果及免疫活性5个层面加以研究山药块茎多糖生物活性功能。试验以刚采收的山药块茎为材料，采用水提醇沉的方法提取山药粗多糖供试验使用。
　　①以O2-自由基、ABTS自由基、DPPH自由基和还原力为指标测定粗多糖的体外抗氧化性。
　　②将山药粗多糖按0.1％，0.3%，0.5%，1.0%和1.5%质量比添加到果蝇培养基中作为5个不同浓度梯度的试验组，零添加为对照组（CK）。将果蝇饲喂于不同试验组培养基中，测定果蝇寿命（半数寿命、平均寿命、最高寿命）、飞翔能力、性活力（潜伏期时间、交配时间）、繁殖力（F1代、F2代数量）和重量等各项生理指标，评价山药粗多糖对果蝇生理特性的影响。
　　③将饲喂于基础培养基30d后转接到不同试验组中继续培养10d的果蝇制成组织匀浆，测定分析山药粗多糖对果蝇体内抗氧化活性的影响。
　　④以常见供试菌种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、青霉菌、根霉菌、黑曲霉菌为试验材料，测定粗多糖对真菌和细菌的抑制作用。
　　⑤用不同浓度山药粗多糖细胞培养液(DMEM完全培养液)体外孵育小鼠巨噬细胞 RAW264.7，观察山药粗多糖对小鼠巨噬细胞形态的影响，测定山药粗多糖对巨噬细胞活性、巨噬细胞分泌因子及代谢酶的影响。综合评价山药块茎粗多糖的生物活性功能及其作用机制。主要结果如下:
　　1、通过试验测定山药粗多糖具有较强的体外抗氧化性：当山药块茎粗多糖浓度为12g/L时，对O2-清除能力最大为0.53，多糖浓度为16 g/L时，对ABTS自由基的清除能力最大为0.55，多糖浓度为20 g/L时，对DPPH·自由基清除能力最大为0.77，且与Vc的清除能力相当，铁离子还原力最大为0.84。
　　2、山药多糖能提高果蝇的寿命、飞翔能力、性活力、繁殖力和增加果蝇重量
　　3山药粗多糖均能增强果蝇体内 T-AOC、SOD、POD、CAT酶活性和降低 MDA的含量，且不同浓度梯度的山药粗多糖对果蝇的作用效果不同。
　　4、山药多糖对青霉和黑曲霉的抑菌效果达到31.25%和22.56%，对枯草芽孢杆菌的抑菌率为34.55%，金黄色葡萄球菌的抑菌率为41.42%，大肠杆菌的抑菌率为21.33%，对细菌、真菌均有不同程度的抑制作用。
　　5、通过用不同浓度的山药粗多糖DMEM完全培养液对巨噬细胞RAW264.7体外培养，试验结果得出，山药粗多糖能维持和增强巨噬细胞的活性，提高分泌因子NO的含量和溶解酶酸性磷酸酶的活性。山药粗多糖能抑制由LPS构建细胞炎症模型中巨噬细胞的活性。山药粗多糖具有双向调节巨噬细胞免疫活性的功能。

目录

声明

缩 略 语 表

1 引言

1.1 多糖简介

1.2 多糖的生物活性功能

1.3 山药多糖

1.4 自由基概述

1.5 本研究的内容及意义

2 材料与方法

2.1 材料与仪器

2.2 试验方法

3 结果与分析

3.1山药粗多糖体外抗氧化活性的测定

3.2 山药粗多糖对果蝇生理特性影响的测定

3.3 山药粗多糖对果蝇体内抗氧化活性的测定

3.4 山药粗多糖抑菌活性的测定

3.5 山药粗多糖对体外培养巨噬细胞免疫活性的影响

4.1 山药粗多糖体外抗氧化活性的测定

4.2 山药粗多糖对果蝇生理特性影响的测定

4.3 山药粗多糖对果蝇体内抗氧化活性的影响

4.4 山药粗多糖抑菌活性的测定

4.5 山药粗多糖对体外培养巨噬细胞免疫活性的影响

5 结论

致谢

参考文献

附录

作 者 简 介