c-erbB-2、K-ras、PTEN在子宫内膜癌中的表达及其相互关系的研究

摘要

子宫内膜癌是女性生殖系统常见的一种恶性肿瘤，它的发生、发展是一个多因素、多步骤的复杂过程。原癌基因的激活，抑癌基因的失活、突变，抗细胞凋亡等不同的机制都可能参与其中。C-erbB-2原癌基因是表皮生长因子家族成员，其过度表达在肿瘤发生、抑制凋亡、细胞迁移、血管生成等中的重要作用已达成共识。K-ras属于ras癌基因家族，可刺激细胞生长、增殖，促进肿瘤发生。PTEN是具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，它可通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡等抑制肿瘤发生、发展，并能多途径地抑制肿瘤浸润和转移。本文通过对正常增生期子宫内膜、子宫内膜非典型增生、子宫内膜癌组织中c—erbB－2、k—ras及PTEN表达的研究，来探讨它们在子宫内膜癌的发生、发展、浸润和转移中的作用及其相互关系。实验材料 1．研究对象：选择临床及病理资料完善的存档蜡块标本4l例，其中子宫内膜癌31例，子宫内膜非典型增生10例，按各临床病理因素分组。另取正常增生期子宫内膜10例做对照。 2．主要试剂与器材：鼠抗人c-erbB-2单克隆抗体，鼠抗人k-ras多克隆抗体，鼠抗人PTEN单克隆抗体，SP试剂盒及DAB显色试剂盒，免疫组化常规试剂及仪器。 实验方法本实验应用免疫组化sP法，检测正常增生期子宫内膜、子宫内膜非典型增生、子宫内膜癌组织中c-erbB-2、k-ras及PTEN的蛋白表达与临床病理特征的关系及三者之间相互作用关系。以细胞内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，按阳性细胞百分比及染色强度进行评分，以二者乘积≥3分为阳性标准来计数三种蛋白染色结果。所得数据采用Fisher精确概率法和kendall'S相关分析作统计学分析，P<0.05为差异显著标准。 实验结果 1．C-erbB-2在子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为40％和58％，经统计学分析差异无显著性(P>0.05)。C-erbB-2在子宫内膜癌中阳性表达率与肿瘤的病理组织分级呈正相关(P<0.05)，与其它临床病理因素不相关。在正常增生期子宫内膜中无c-erbB-2的阳性表达。 2．K-ras在子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为70％和25.8％，经统计学分析差异有显著性(P<0.05)。K-ras在子宫内膜癌中阳性表达率与肿瘤的病理组织分级呈负相关(P<0.05)，与其它临床病理因素不相关。在正常增生期子宫内膜中无k-ras的阳性表达。 3．PTEN在子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为60％和25.8％，二者比较差异有显著性(P<0.05)。PTEN在子宫内膜癌中阳性表达率与肿瘤的雌激素受体状态明显相关，二者差异有极显著意义(P<0.01)，与其它临床病理因素不相关。在正常增生期子宫内膜中PTEN100％阳性表达。 4．经Kendall’s相关分析显示：子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌中的c-erbB-2、k-ras和PTEN表达无明显相关性。 c-erbB-2是编码酪氨酸激酶类癌基因，与表皮生长因子受体(EGFR)同源，c-erbB-2蛋白由信号肽、配体结合区、跨膜区、胞浆区四部分组成。蛋白酪氨酸激酶类受体靠受体二聚合而活化，最后激活有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)的反应，促进有丝分裂，并对肿瘤发展起重要作用,如对细胞运动性的影响、细胞粘附、浸润、细胞生存和血管生成等。 研究发现c-erbB-2在多种恶性肿瘤包括子宫内膜癌中有过度表达,并与不良预后有关。本实验发现,e-erbB-2在子宫内膜癌组织中的阳性表达率高于子宫内膜非典型增生,但二者的差异无显著性(P>0.05),提示在子宫内膜癌的发生中c-erbB-2可能不起主要作用。在对照组正常增生期子宫内膜中无c-erbB-2的阳性表达。另外,c-erbB-2在子宫内膜癌中阳性表达率随肿瘤的病理分化级别增高而增高,提示c-erbB-2的阳性表达可能与病人的不良预后相关。 k-ras属于ras癌基因家族,具有GTP酶活性,ras激活后通过raf信号通路激活细胞内MAPK信号转导通路,刺激细胞生长、发育、增殖,最终导致细胞的恶性转化、黏附性以及迁移性等方面的改变。众多的临床研究提示k-ras的激活在子宫内膜癌早期阶段发生,但发生的几率多少不一,与预后评估的关系说法不一。本实验中k-ras在子宫内膜癌组织中的阳性表达率明显低于子宫内膜非典型增生,提示在子宫内膜癌的早期发生过程中就有k-ras的高表达,可能参与子宫内膜癌发生的启动。在对照组正常增生期子宫内膜中无k-ras的阳性表达。另外,k-ras在子宫内膜癌中阳性表达率随肿瘤的病理分化级别增高而降低,提示k-ras的阳性表达发生于子宫内膜癌的早期。 PTEN基因是具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,既有脂质磷酸酶活性,又有蛋白磷酸酶活性,可使细胞停止于G<,1>期或发生凋亡及调节细胞的转移和黏附。 研究发现PTEN在多种恶性肿瘤包括子宫内膜癌中有表达缺失,并与不良预后有关。本实验发现,PTEN在子宫内膜癌组织中的阳性表达率明显低于子宫内膜非典型增生,提示PTEN表达的缺失在子宫内膜癌的早期发生中起着一定的作用。对照组正常增生期子宫内膜中PTEN100[％]阳性表达。另外,PTEN在子宫内膜癌中阳性表达率与肿瘤的雌激素受体状态明显相关,ER阴性患者PTEN的阳性表达率明显低于ER阳性患者,提示PTEN表达缺失常见于ER缺失的子宫内膜癌。 c-erbB-2、k-ras和PTEN在子宫内膜癌中可能致癌机制尚未阐明。理论上,三者可能通过MAPK通路相互关联。本实验对子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌组织进行了c-erbB-2及k-ras与PTEN表达的测定,未发现三者有相关性,提示在子宫内膜癌的发生中,c-erbB-2与k-ras的协同作用及PTEN与c-erbB-2及k-ras的负协同作用尚不能确定。 1．c-erbB-2在子宫内膜癌中阳性表达随肿瘤的病理分化级别增高而增高。 2．在子宫内膜癌的早期发生过程中就有k-ras的高表达，其阳性表达随肿瘤的病理分化级别增高而降低，提示k-ras的阳性表达发生于子宫内膜癌的早期，可能参与子宫内膜癌发生的启动。 3．PTEN表达的缺失在子宫内膜癌的早期发生中起着一定的作用，PTEN表达缺失常见于雌激素受体(ER)缺失的子宫内膜癌。 4．在子宫内膜癌的发生中，c-erbB-2与k-ras的协同作用及PTEN与c-erbB-2及k-ras的负协同作用尚不能确定。

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中文论著摘要

英文论著摘要

英文缩略语

前言

实验材料与方法

实验结果

讨 论

结 论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综 述原癌基因c-erbB-2、K-ras及抑癌基因PTEN在子宫内膜癌中的研究进展

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