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高压氧对正常及系统性全身反应综合征大鼠T淋巴细胞和细胞因子的影响

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摘要

目的:
   高压氧作为一种治疗手段,在临床应用由来以久。目前有关机构已经证实了高压氧具备的14个适应症:包括气性坏疽,坏死性软组织感染,糖尿病足,器官和皮瓣移植,骨感染,颅内脓肿,贫血和失血,挤压综合症,一氧化碳和氰化物中毒,放射性疾病,减压病,气体栓塞。对高压氧的免疫调节作用和抗炎作用的研究在全身炎症反应综合征中的应用尚不多见。经过10余年的大量实验研究和临床资料揭示,创伤、感染、休克发展到MODS存在着一条共同通路,即系统性炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)。本实验以SIRS为基础,以免疫功能和炎症反应中具有代表性的CD4和CD8T淋巴细胞以及细胞因子TNF-a,IL-6,IL-10为研究对象,研究高压氧对正常大鼠和SIRS状态下大鼠的影响,以及三次治疗组同一次治疗组有无差异。
   方法:
   健康雄性SD大鼠40只,体重约140~180g,随机分为5组,每组8只。A组:腹腔注射等量生理盐水;B组:腹腔注射等量生理盐水,做3次高压氧;C组:腹腔注射酵母多糖-石蜡悬液(500mg/kg);D组:腹腔注射酵母多糖-石蜡悬液(500mg/kg),做1次高压氧;E组:腹腔注射酵母多糖-石蜡悬液(500mg/kg),做3次高压氧。单次高压氧为2ATA,60分钟,并且期间持续通氧气,保持氧浓度在95%以上。三次高压氧时间分别为腹腔注射后4小时,10小时和18小时。所有大鼠统一于腹腔注射后24小时处死,抽取外周血采用流式细胞技术分析血CD3+CD4+和CD3+CD8+淋巴细胞数量及比例,以及CD3+CD4+/CD3+CD8+细胞比值。用ELISA法测定血TNF-α,IL-6和IL-10含量。所有结果用SPSS 13.0 for Windows软件统计分析。
   结果:
   SIRS组大鼠部分出现循环中细胞因子爆发式增多。高压氧降低正常大鼠CD4T细胞比例(P<0.01),对CD8T细胞无影响,同时使CD4/CD8T细胞比值明显下降(P<0.01);高压氧使SIRS组大鼠减少的CD4T细胞明显提高(P<0.01),对CD8T细胞的下降无影响;在正常大鼠和循环中未出现高炎症反应的大鼠中,高压氧使循环中TNF-α和IL-6含量增多(P<0.01),IL-10减少(P<0.01);在高炎症反应大鼠中,高压氧表现出明显的抗炎作用,使TNF-α和IL-6含量减少(P<0.01),IL-10增多(P<0.01)。三次高压氧同一次高压氧对SIRS大鼠淋巴细胞的作用无统计学差异;SIRS大鼠三次高压氧治疗组未出现高炎症反应个体,实验结果显示三次高压氧比一次高压氧的炎症作用稍强,但未计算出统计学差异。
   结论:
   高压氧根据机体正常或疾病状态产生不同影响。在正常机体表现为免疫抑制和致炎作用,对外源性刺激引起的免疫功能下降和高炎症反应却表现出促进淋巴细胞恢复和对抗炎症的作用。高压氧的次数同其作用之间可能存在剂量依赖关系。

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