TRPV亚型mRNA在STZ诱导的糖尿病大鼠膀胱的表达

摘要

实验目的：
　　 糖尿病膀胱功能障碍是糖尿病的常见并发症之一,主要表现为膀胱感觉减退,逼尿肌收缩力下降,膀胱容量增大,残尿量增加以及尿失禁。另外,近来的研究已经揭示了逼尿肌过度活动的存在,表现为尿频和尿急。糖尿病引起的膀胱功能障碍的原因是复杂和多方面的,包括神经的、激素的、肌原性的和膀胱上皮的改变,然而,确切的机制仍然还不清楚,还需继续研究。
　　 本实验研究在链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型的膀胱中TRPV亚型的mRNA水平是否发生改变,并探究改变的TRPV亚型的mRNA水平是否对糖尿病引起的膀胱功能障碍有影响。
　　 实验方法：
　　 雄性Wistar大鼠随机分成三组:糖尿病组,多尿对照组以及正常对照组。糖尿病组禁食12小时后,单次腹腔注射溶于PH4.5,浓度为0.1mol/L枸橼酸缓冲液的链脲佐菌素(STZ),剂量为65mg/kg体重。其余两组只注射同等剂量的枸橼酸缓冲液。多尿对照组,以5％蔗糖水作为饮用水诱导高渗性多尿。72小时后测尾静脉血葡萄糖浓度＞300mg/dL(16.7mmol/L)并持续一周为造模成功。于诱导糖尿病后2,4,8,16和24周进行相关检查。通过尿流动力学检查对膀胱功能进行评价,记录膀胱容量(至排尿时所灌注的生理盐水量),单次排尿量(经尿道口排出的生理盐水量),残尿量(排尿后经膀胱内导管引出的剩余生理盐水量),膀胱内最大压力(排尿时膀胱内最大压力的峰值),排尿率(排尿量/膀胱容量*100％)。以上参数均取三次试验的均值。取出膀胱后应用real-time PCR方法检测膀胱组织中TRPV亚家族mRNA的表达水平。
　　 实验结果：
　　 在注射STZ之前,各组间的体重(对照组219.9±1.0g;多尿组223.4±1.4g;糖尿病组220.6±1.7g)和血糖(对照组92.0±1.8mg/dL;多尿组92.0±1.9mg/dL;糖尿病组94.6±2.3 mg/dl)无明显差异。与多尿对照组和正常对照组相比,在糖尿病进程中的每个时期,糖尿病组的体重明显下降,血糖明显升高。并且多尿对照组和糖尿病组的膀胱重量明显高于正常对照组。
　　 麻醉状态下的尿流动力学检查发现,STZ诱导糖尿病后,糖尿病组和多尿对照组的平均膀胱容量明显大于正常对照组(P＜0.001)。另外,在诱导糖尿病后的2周,在糖尿病组和多尿对照组的平均膀胱容量也有显著差别(P＜0.01)。另一方面,糖尿病组的排尿率明显低于其它两组(P＜0.001)。在糖尿病进展的早期阶段,糖尿病组的排尿率显著下降,但三组的平均膀胱内最大压力没有显著的差别。在STZ诱导后的16周和24周时,糖尿病组平均膀胱内最大压力要明显高于多尿对照组和正常对照组(P＜0.05和P＜0.01)。
　　 与多尿对照组和正常对照组相比,除了糖尿病诱导后2周外,其它时间点糖尿病组TRPV1和TRPV4的mRNA水平明显降低;糖尿病组的TRPV2 mRNA水平明显高于多尿对照组和正常对照组,除了糖尿病诱导后的24周;糖尿病诱导后的4,8周的糖尿病组TRPV3 mRNA水平以及诱导后2,4,8周的糖尿病组TRPV5 mRNA水平明显高于多尿对照组和正常对照组,在诱导后16和24周糖尿病组TRPV3和TRPV5mRNA水平明显低于多尿对照组和正常对照组;在大鼠膀胱中没有TRPV6 mRNA的表达。
　　 实验结论：
　　 由于糖尿病的影响,大鼠膀胱中TRPV亚家族mRNA水平发生了显著的变化。TRPV2 mRNA水平的增高,可能会导致糖尿病早期阶段膀胱过度活动。而TRPV1和TRPV4 mRNA水平的下降,可能会导致糖尿病的膀胱感觉减退。本实验表明糖尿病显著的改变了大鼠膀胱中TRPV亚型mRNA水平,这些TRPV亚型mRNA水平的改变,可能会导致糖尿病大鼠膀胱功能障碍的发生。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英文缩略语

前言

实验材料与方法

实验结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 TRPs与膀胱

在学期间科研成绩

致谢

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