烟酰胺联合碱性成纤维细胞生长因子体内诱导骨髓干细胞治疗大鼠糖尿病的实验研究

摘要

目的:
　　 当今，糖尿病已成为患病人数众多并极具破坏性的疾病。目前主要是以口服抗高糖药物及胰岛素治疗为主。而干细胞治疗糖尿病已经进入人们的视野，诸多的研究已表明，干细胞治疗糖尿病，尤其是1型糖尿病，已取得初步成果，成为有希望治愈糖尿病的疗法。其中骨髓干细胞(Bone marrow stem cells，BMSCs)因其具有较强的可塑性并易于获得，所以应用前景广阔。目前已有关于BMSCs在体外向胰岛素分泌细胞(Insulin-producing cells，IPCs)分化的报道。但在体外条件下诱导分化干细胞存在易污染及致瘤性等问题，因此，本研究探讨烟酰胺(Nicotinamide，N)和碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor，bFGF)在STZ致糖尿病大鼠体内能否诱导BMSCs分化为IPCs，从而对糖尿病大鼠起到治疗作用。
　　 材料和方法:
　　 一、实验动物分组及处理
　　 40只雄性SD大鼠按随机数字表随机分为两组：健康对照组(10只)和造模组（30只）。造模组大鼠一次性腹腔注射2％链脲佐菌素(STZ)55mg/kg，建立STZ糖尿病大鼠模型，随机分为糖尿病未治疗组、单纯动员组和动员并诱导组，每组10只。其中单纯动员组和动员并诱导组分别皮下注射10μg/kg.d重组人粒细胞集落刺激因子（thG-CSF，商品名特尔津），连续15天，健康对照组和糖尿病未治疗组给予相当剂量的生理盐水皮下注射。动员并诱导组自注射thG-CSF第2天起给予烟酰胺800mg/kg.d灌胃及碱性成纤维细胞生长因子1050U/只d腹腔注射，连续14天，健康对照组、糖尿病未治疗组和单纯动员组给予同等剂量的生理盐水灌胃及腹腔注射。
　　 二、生化指标的检测及方法
　　 整个实验中，各组大鼠每周测一次体重及血糖。治疗前和实验终止时各取血测血清胰岛素一次(ELISA法)，实验终止时10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉，取胰腺、肝脏和脾脏，用免疫组织化学染色(SABC法)检测其中胰岛素染色阳性细胞表达。图像采集分析系统对各组大鼠胰腺组织中胰岛素染色阳性细胞面积占胰岛面积百分比进行分析。
　　 结果:
　　 一、生化检测结果
　　 治疗前，糖尿病未治疗组、单纯动员组及动员并诱导组大鼠血糖、血清胰岛素无显著性差异。治疗2周时，动员并诱导组大鼠血糖低于糖尿病未治疗组及单纯动员组(P＜0.05)，但仍高于健康对照组(P＜0.05)；治疗4周时，动员并诱导组血糖低于糖尿病未治疗组及单纯动员组，但高于健康对照组(P＜0.05)；单纯动员组大鼠的血糖、血清胰岛素与糖尿病未治疗组无显著性差异(P＞0.05)，动员并诱导组血清胰岛素水平高于糖尿病未治疗组及单纯动员组(P＜0.05)，但低于健康对照组(P＜0.05)。治疗2周时，糖尿病未治疗组大鼠体重低于健康对照组(P＜0.05)但与单纯动员组及动员并诱导组大鼠相比无显著差异(P＞0.05)，治疗4周时糖尿病未治疗组、单纯动员组大鼠体重低于健康对照组(P＜0.05)而动员并诱导组与健康对照组、糖尿病未治疗组及单纯动员组大鼠体重并无明显差异(P＞0.05)。
　　 二、免疫组织化学及图像分析结果
　　 实验终止时免疫组织化学检测胰腺中胰岛素阳性细胞百分比发现健康对照组明显高于其他各组(P＜0.01)，动员并诱导组低于健康对照组但是明显高于糖尿病未治疗组(P＜0.01)及单纯动员组(P＜0.01)，而糖尿病未治疗组及单纯动员组间无显著性差异(P＞0.05)。在动员并诱导组的肝脏和脾脏中发现胰岛素染色阳性细胞表达，其他各组肝脏和脾脏中均未发现胰岛素染色阳性细胞表达。
　　 结论:
　　 1、烟酰胺联合碱性成纤维细胞生长因子可以将骨髓干细胞在体内诱导分化为胰岛素分泌细胞。
　　 2、由骨髓干细胞分化而来的胰岛素分泌细胞对改善糖尿病大鼠高血糖状态、提高胰岛素分泌量、恢复胰岛功能等起到一定程度的治疗作用，但对糖尿病的长期治疗效果尚待进一步研究。

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文摘

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英文缩略语

论文 烟酰胺联合碱性成纤维细胞生长因子体内诱导自体肝细胞治疗大鼠糖尿病的实验研究

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

本研究创新性自我评价

参考文献

综述 肝细胞治疗糖尿病实验研究的进展

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