猪伪狂犬病蜂胶灭活疫苗的免疫效果比较研究

摘要

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科猪疱疹病毒Ⅰ型(Suid Hepervirus Ⅰ，SHV-Ⅰ)，引起的包括多种家畜和野生动物共患的一种急性传染病。感染猪后，本病可引起严重的繁殖障碍，给养猪业造成很大的经济损失。目前控制猪伪狂犬病的主要措施是及时、准确地诊断，并采取安全而有效的疫苗进行预防接种。为了给我国的养猪行业提供安全有效的疫苗，我们开展以下的研究。 针对目前广泛使用的白油佐剂疫苗存在注射困难及使用后对机体刺激性大，注射部位呈炎症反应等缺点，我们选择天然蜂胶的提取物来作为免疫佐剂并研制成了伪狂犬蜂胶灭活疫苗。通过对本疫苗的杂菌检验、灭活性检验和动物安全性检验显示，疫苗安全系数达到100％，且对妊娠母猪安全可靠。同时对免疫动物进行ELISA试验得出，该疫苗的最小免疫剂量为10<'5.0>FCID<,50>，一次免疫的保护持续期可长达6个月以上。 通过淋巴细胞转化试验、免疫器官指数试验，我们对伪狂犬蜂胶灭活疫苗与市售白油佐剂灭活疫苗、弱毒冻干苗的免疫后对细胞免疫调动情况进行了比较。结果显示，伪狂犬蜂胶灭活疫苗对免疫后机体的细胞免疫促进作用最强，脾增重平均值为(0.79％)明显高于白油疫苗组的(0.52％)与弱毒疫苗组的(0.55％)。 结合ELISA试验和微量中和试验，对该疫苗免疫后的体液免疫水平进行了进一步的检测发现，相对于油佐剂疫苗，该疫苗免疫后产生抗体时间更早，滴度更高，持续时间更长；同时，经淋转试验证实，蜂胶疫苗免疫可增加脾淋巴细胞刺激原作用下的增殖能力，且与油苗组、空白对照组相比差异极显著。与SNT相比，ELISA具有快速、敏感、使用简便的优势，ELISA试验可以代替传统的SNT使用在伪狂犬疫苗抗体检验中。 用田间试验结果绘制了伪狂犬病蜂胶灭活疫苗免疫健康敏感猪的抗体消长规律曲线。在免疫后7d即可产生抗体， 35d抗体水平达到最高，从90d以后开始缓慢下降，直至190d时仍能保持在峰值的一半水平，证明了健康敏感猪的抗体可维持6个月以上，且不易受母源抗体干扰，且疫苗免疫后能够有效地提高产仔成绩。 以上研究结果表明，将蜂胶用于新型疫苗的免疫佐剂，可以产生油佐剂疫苗不可比拟的良好效果。因此，不断地开发并应用蜂胶佐剂疫苗必将产生巨大的社会效益和经济效益，也为蜂胶更广泛的应用开辟崭新的前景。

目录

声明

第一章前言

文献综述

1.1猪伪狂犬病诊断检测方法的研究进展

1.2伪狂犬病病毒的免疫学研究进展

第二章PRV蜂胶佐剂灭活疫苗的研制

2.1材料

2.2方法

2.3结果

2.4小节与讨论

第三章3种PRV疫苗对实验动物免疫应答的影响

3.1材料

3.2方法

3.3结果

3.4小节与讨论

第四章田间试验

4.1方法

4.2结果

4.3小节与讨论

第五章结论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章

附录