多索茶碱抑制U937细胞增殖与诱导凋亡的体外实验研究

摘要

目的：
　　 急性髓系白血病(AML)是一组高度异质性的疾病，也是成人急性白血病中最普遍的类型，主要表现为髓系祖细胞不同程度分化成熟障碍，白血病细胞恶性增殖和凋亡受阻，其发病机制目前尚未完全阐明。目前对白血病的治疗主要以药物联合化疗结合对症支持治疗为主，随着治疗方法的不断改进，AML的完全缓解率及长期生存率有了较大提高，但是仍有部分患者化疗失败，其主要原因是患者对现有化疗药物不敏感或在化疗后出现耐药，因此，研究新的药物联合治疗，对提高AML患者的完全缓解率及预后意义重大。
　　 多索茶碱属于茶碱类药物，是甲基黄嘌呤的衍生物，是目前用于治疗哮喘和慢性阻塞性肺疾病的常用药物之一。近年来国内外均有研究提示茶碱类药物有诱导细胞凋亡的作用，国内有报道氨茶碱可以诱导K562白血病细胞凋亡，多索茶碱作为其同类药物，其不良反应远较氨茶碱低，使用时安全系数高。本实验拟将多索茶碱作用于体外培养的急性髓系白血病细胞U937，观察其对细胞的增殖及凋亡的影响，为多索茶碱应用于白血病的临床辅助治疗提供依据。
　　 方法：
　　 由本院血液研究室获取冻存的白血病细胞U937，复苏后进行细胞培养，将细胞培养至对数生长期进行实验。分别配制0.0mg/L、5.0mg/L，10.0mg/L，15.0mg/L，30.0mg/L，60.0mg/L浓度的多索茶碱溶液，分别加入一定数目的U937细胞中，培养12h及24h后，WST-1方法检测细胞增殖抑制率，TUNEL法检测各组细胞凋亡情况。结果用均数±标准差(X±SD)表示。采用SPSS统计处理软件进行方差分析，以P＜0.05为差别有统计学意义。
　　 结果：
　　 WST-1方法检测细胞增殖抑制率，结果显示不同浓度的多索茶碱分别作用于U937细胞12 h及24h后，细胞抑制率随着作用时间的延长和药物浓度的增加而逐渐增加(P＜0.01)。
　　 TUNEL法检测细胞凋亡结果表明，细胞凋亡具有显著的浓度依赖性(P＜0.01)和时间依赖性(P＜0.01)。
　　 结论：
　　 通过实验证实多索茶碱能够抑制白血病细胞U937细胞株增殖，诱导其凋亡，并具有浓度依赖性及时间依赖性。

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