BPD新生鼠内质网应激相关因子CHOP及自噬相关蛋白LC3B表达的研究

摘要

目的:
　　探讨高氧致新生大鼠支气管肺发育不良(BPD)发生过程中肺组织ERS相关因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、ATF4及自噬标志物LC3B在BPD中的作用及CHOP与LC3B二者之间是否存在相互作用。
　　研究方法:
　　80只新生大鼠随机分为模型组(FiO2=80％-85％)和对照组(FiO2=21％)。两组新生鼠分别于1d、7d、14d、21d随机处死，采集肺组织标本，采用辐射状肺泡计数(RAC)和肺泡间隔厚度评价肺泡发育程度，透射电镜观察超微结构改变，免疫组织化学观察肺组织ATF4、 CHOP、LC3B定位及分布，免疫荧光观察肺组织CHOP、LC3B的共定位，RT-PCR、Western blot检测ATF4、CHOP、LC3B基因及蛋白表达水平，Pearson相关分析用于CHOP、LC3B-Ⅱ蛋白的相关性分析。
　　结果:
　　模型组RAC值从7d开始低于对照组，持续至21 d(P＜0.05)，肺泡间隔厚度从7d开始高于对照组，21d达最高(P＜0.05);TEM观察到模型组14dAECⅡ板层小体破坏，细胞内存在明显的内质网扩张和自噬现象;与对照组相比，模型组ATF4、CHOP、LC3B蛋白明显升高，于7d开始升高，14d达峰(P＜0.05);与对照组相比，模型组CHOP、LC3B mRNA表达水平较低（7d、14d、21d P＜0.05）;模型组14d肺组织内可见CHOP、LC3B的共定位细胞;Pearson相关性分析表明，模型组CHOP蛋白和LC3B-Ⅱ蛋白表达水平呈正相关(r=0.977，P＜0.01)。
　　结论:
　　BPD损伤了肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)，与以往相似的是超微结构上存在微绒毛脱落、稀疏，板层小体空泡化等特点，我们又发现了AECⅡ内质网处于扩张状态，且存在包含内质网等细胞器的自噬小体，且内质网应激相关因子CHOP及自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ均呈表达上调状态，它们可能参与了BPD的发生、发展过程，二者共同调节BPD的发生、发展;

目录

声明

摘要

英文缩略语

1 前言

2．1 主要试剂和仪器

2．2 研究对象和分组

2．3 实验方法

2．4 统计学分析

3 结果

4 讨论

5 结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 内质网应激与自噬的相互作用在疾病中的研究进展

致谢

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