包埋脱水法保存条斑紫菜自由丝状体的研究

摘要

本文以条斑紫菜(PorphyayezoensisUeda03C、03D)自由丝状体为试验材料，用包埋脱水法进行保存。主要研究了包埋后超低温(-196℃)保存。 在超低温保存中将丝状体包埋在含3％褐藻酸钙的胶球中，经硅胶砐湿法脱水后，探讨了脱水速率、胶球含水量及化冻温度对冰冻保存存活率的影响。结果表明： 1.脱水速率对存活率的影响包埋后，分别以1％、5％、7.5％、10％、15％、20％的平均脱水速率(％含水量/h)进行脱水，结果两种株系都是在7.5％含水量/h的较高的脱水速率下获得最高存活率。 2.含水量对存活率的影响以7.5％含水量/h的脱水速率脱水，胶球含水量对冰冻前的存活率影响不大，但对冰冻保存后的存活率影响很大。两种株系的最佳含水量都为25％，丝状体03C冰冻保存后存活率可达68.8％，丝状体03D的存活率也可达到30.1％。 3.化冻温度的影响以丝状体03D为研究对象，选用最佳脱水速率及最佳含水量点冰冻后，分别用0、20、30、40、50℃进行化冻。结果在30℃-50℃的较高化冻温度下，条斑紫菜丝状体03D的存活率显著高于0℃-20℃下的存活率。其中，30℃为最佳化冻温度，存活率可达到34.8％。 同时又初步探索了常低温保存。在包埋脱水法常低温保存中以丝状体03D为试材，用包埋脱水法进行了常低温保存的研究。用相同方法包埋脱水后，密封放在20℃(光、暗)、4℃、-20℃条件下保存。结果为在4℃条件下较低的含水量的材料保存的时间最长且有很高的存活率。

目录

前言

第一部分超低温冷冻保存

1材料与方法

1.1材料来源及其培养

1.2主要试剂及配制

1.3主要仪器设备

1.4实验方法

2.结果与分析

2.1不同提取剂对叶绿素提取效果的影响

2.2脱水速率对存活率的影响

2.3胶球含水量对存活率的影响

2.4化冻温度对存活率的影响

2.5冷冻保存后条斑紫菜丝状体的形态观测

3.讨论

3.1脱水速率对存活率的影响

3.2胶球含水量对存活率的影响

3.3化冻温度对存活率的影响

4.小结

第二部分包埋脱水法常低温保存

结果与讨论

含水量对存活率的影响

保存条件对存活率的影响

2.3保存后条斑紫菜丝状体的形态观测

3.小结

结论

综述

1.种质保存技术概述

1.1种质保存的目的、意义

1.2植物种质保存技术的主要方法

2.植物种质的超低温保存

2.1植物种质超低温保存的意义

2.2植物种质超低温保存技术的原理及理论基础

2.3植物物种质超低温保存方法

2.4植物种质超低温保存的程序和主要影响因素

3.藻类种质超低温保存的研究进展

3.1藻类超低温保存的意义

3.2影响藻类超低温保存存活率的主要因素

3.3存活率的鉴定

3.4藻类超低温保存技术的改进和研究进展

4.包埋脱水法冰冻保存技术

4.1褐藻胶包埋技术

4.2脱水

4.3包埋脱水技术的特点

参考文献

致谢

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