OVCA1基因对人卵巢癌细胞系A2780细胞周期抑制的分子机制研究

摘要

目的：研究OVCA1基因对人卵巢癌细胞系A2780细胞内cyclinD1、p16、NF-κB的调节作用，探讨其是否通过调节cyclinD1的表达水平，发挥调节细胞周期、抑制肿瘤发生发展的作用，以及OVCA1基因通过那些直接或间接作用引起cyclinD1表达水平的变化，从而揭示OVCA1基因对A2780细胞的细胞周期抑制的分子机制。 方法：选用A2780细胞(人卵巢癌细胞系A2780)与A2780-OVCA1细胞(单克隆的稳定表达OVCA1基因的人卵巢癌细胞株A2780)进行体外培养，采用成集落的细胞培养试验检测OVCA1基因对A2780细胞增殖活性的影响；RT-PCR技术检测细胞内cyclinD1、p16的mRNA表达水平；免疫细胞化学技术检测细胞内cyclinD1、p16、NF-κB的蛋白表达水平，对细胞内cyclinD1、p16的蛋白表达同时采用免疫荧光技术进行检测。 结果：1.A2780-OVCA1细胞集落形成百分率为58.5040士3.8799﹪，A2780细胞集落形成百分率为78.8660士7.4908﹪，差异有统计学意义(P＜0.01)。2.A2780-OVCA1细胞内cyclinD1的mRNA相对含量为0.9752±0.1055，A2780细胞内cyclinD1的mRNA相对含量为1.4154士0.1149，差异有统计学意义(P＜0.01)；A2780-OVCA1细胞内p16的mRNA相对含量为0.3562士0.0042，A2780细胞内p16的mRNA相对含量为0.1865士0.0111，差异有统计学意义(P＜0.01)。3.A2780-OVCA1细胞中cylinD1的免疫细胞化学染色强度与免疫荧光染色强度均弱于A2780细胞，p16的两种染色强度均强于A2780细胞，通过平均光密度值比较，差异均有统计学意义(P＜0.01)。4.cyclinD1与p16的表达在mRNA水平与蛋白水平均不具有相关性(p＞0.05)。5.OVCA1基因在mRNA水平及蛋白水平对A2780细胞内cyclinD1的抑制率无统计学差异(P＞0.05)；OVCA1基因对p16的上调率在mRNA水平为91.3944士2.4942﹪，蛋白水平为38.9152士2.8227﹪，差异有统计学意义(P＜0.01)。6.两种细胞内NF-κB蛋白的表达总量、胞浆表达量、胞核表达量均没有统计学差异(P＞0.05)。 结论：1.OVCA1基因对人卵巢癌细胞系A2780细胞的生长具有明显的抑制作用。2.抑制cyclinD1的mRNA表达是OVCA1基因抑制肿瘤细胞增殖的机制之一。3.OVCA1基因对cyclinD1的抑制机制与上调p16的mRNA表达有关，是否存在其他途径对cyclinD1进行调节尚待进一步研究。4.OVCA1基因对A2780细胞内cyclinD1的抑制作用不是通过调节NF-κB的蛋白表达来实现的。

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综述 细胞周期调控因子cyclinD1、p16与妇科恶性肿瘤

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