丝裂霉素术中腹腔温热化疗对Wistar大鼠结肠吻合口血管生成的影响研究

摘要

人类试图用化学药物治疗癌症由来己久，而从60年代以后，才真正地建立起了比较完善的研究和使用体系。目前有不少癌症可以通过化学药物治愈，而肿瘤的治疗是一种综合治疗，所以要将肿瘤的治疗学掌握好、应用好需要更多方面的知识和经验。随着肿瘤治疗研究的发展，肿瘤临床治疗的方法也日趋多样化。术中腹腔温热化疗IPHC(新辅助疗法)是八十年代才发展起来的一种治疗肿瘤的新方法，是腹腔化疗与局部热疗相结合的一种外科减瘤术后的局部辅助疗法，在杀灭腹腔内游离的肿瘤细胞和微小癌转移灶，预防肿瘤复发，提高术后生存率等方面优于传统疗法。然而，术中腹腔温热化疗在对肿瘤细胞产生细胞毒作用的同时，也会对正常细胞产生细胞毒作用，这种作用在吻合口部位表现的更为明显。众所周知，新生血管对伤后愈合起着至关重要的作用，本课题旨在通过研究运用丝裂霉素行术中腹腔温热化疗对Wistar大鼠结肠肠吻合口新生血管生成的影响及机制，以此来探讨术中腹腔温热化疗的安全性和可行性。 方法： 健康大鼠54只行左半结肠离断，断端端端吻合术后随机分为3组，每组18只，处置如下：A：37℃常温灌注组(IPNP组)；B：43℃温热灌注组(IPHP组)；C：43℃温热化疗组(IPHC组)，化疗药物为丝裂霉素8mg/L。分别于术后第1，3，5，7，14，28天切取吻合口周围结肠，行HE及VEGF免疫组化染色、MVD计数、RT-PCR法检测血管内皮生长因子mRNA的相对表达量；采用单因素方差分析及Pearson相关分析处理实验数据，P<0.05认为有显著性差异。 结果： 1．HE染色病理观察示常温组于术后1天新生毛细血管即见增多，3天毛细血管明显增多，术后5天毛细血管数量达高峰，7-28天逐渐减少、闭合、退化，温热组变化与常温组变化趋于一致。温热化疗组于术后5天始见增多，14天达高峰，术后28天基本趋于基线水平。 2．免疫组化染色病理观察示VEGF蛋白在正常结肠吻合口周围的血管内皮细胞、成纤维细胞和部分炎细胞胞浆内呈弱阳性表达。常温组血管内皮细胞胞浆vEGF蛋白表达在伤后第1天呈阳性，伤后5天成强阳性，而于伤后7天阳性程度逐渐减弱，温热组与常温组变化趋于一致。与上述两组相比，温热化疗组血管内皮细胞胞浆VEGF蛋白表达在伤后3天部分成阳性、部分成弱阳性，伤后5、7天成强阳性，伤后14天成阳性，28天于血管内皮细胞胞浆内呈弱阳性。 3．常温组与温热组动物微血管密度(MVD)随时间变化趋势基本趋于一致，均于术后1天即明显增多，5天达峰值并维持在较高水平，7天开始逐渐减少，28天降至较低水平。温热化疗组MVD变化趋于平缓，术后早期计数变化不显著，3天后逐渐升高，术后第14天达高峰，随即减少，28天降至较低水平。温热组与常温组比较MVD仅于第1天存在显著差异，其它各时间段均无显著差异。温热化疗组与常温组比较除第7、28天外各时间段均存在显著差异。 4．各实验组VEGF-mRNA相对表达量与MVD呈平行变化。随MVD的增加，vEGF-mRNA相对表达量亦增高。经单因素方差分析温热组与常温组比较VEGF-mRNA相对表达量仅于术后第l天存在显著差异，其它各时间段均无显著差异。温热化疗与常温组比较除第7、28天外各时间段均存在显著差异。经Pearson相关分析，VEGF表达强度与MVD间有显著相关性(r<,1>=0.92 p<,1><0.01，r<,2>=0.97p2<0.01， r<,3>=0.94 p3<0.01)。 结论： 1．温热效应对结肠吻合口新生血管生成存有不利影响，但此影响仅局限于术后早期。温热效应联合使用MMC行IPHC对新生血管生成的影响明显，其协同的影响作用表现的显著而持久。 2．术后第7天各组实验动物吻合口周围新生血管均增值到一较高水平，且无统计学差异，可被认为是吻合口愈合的关键时期。 3．VEGF对血管内皮细胞有特异的促有丝分裂作用，是有效的内源性大鼠结肠血管生长因子。在结肠吻合术后，VEGF与结肠吻合口新生血管生成有时间上的相关性，并在其中发挥重要作用。 4．温热效应联合使用MMC行IPHC在分子水平上即影响了VEGF的转录及表达，以此进一步抑制了新生血管的生成。

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摘要

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材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 胃肠道癌术中腹腔温热化疗研究现状及进展

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