中药提取物体外抗真菌活性的实验研究

摘要

目的：本研究采用中药提取、体外药物敏感试验和扫描电镜的方法，观察黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子等六味常用中药的水提取成分和乙醇提取成分，对7种浅部真菌的体外抗真菌活性，研究不同中药单体、不同提取成分对不同浅部真菌的抑菌作用和杀菌作用，拟寻找来源广泛，价格低廉，副作用小的有效抗真菌中药。 方法：将黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子六味中药分别用蒸馏水和95﹪乙醇提取得中药水提取和乙醇提取粉末或浸膏。采用药基琼脂稀释法，检测对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌、白念珠菌、糠秕马拉色菌等7种浅部真菌的体外抗真菌活性。白念珠菌组置于37℃温箱孵育24～48小时，糠秕马拉色菌组置于37℃温箱孵育3～4天；皮肤癣菌组置于26℃温箱孵育7天判读最小抑菌浓度(MIC)。将新鲜的沙氏液体培养基(SDA)倒入没有真菌生长的含药培养基中，接种环轻刮培养基表面，沙氏液体培养基震荡充分后倒出，白念珠菌组置于37℃温箱孵育3天、皮肤癣菌组置于26℃温箱孵育7天判读最小杀菌浓度(MFC)；糠秕马拉色菌组，将倒出的沙氏液基离心，弃上清液，沉淀物接种于含4﹪橄榄油的SDA培养基，置于37℃温箱孵育7天判读MFC。将浓度为2.5mg/ml水提黄连溶液和浓度为0.3125mg/ml乙醇提蛇床子溶液加入已转种活化7天的红色毛癣菌标准株T<,·la>试管中，分别于作用2小时、8小时、24小时，各取出一块菌块，采用扫描电镜观察水提黄连、醇提蛇床子对红色毛癣菌形态影响的连续性变化。 结果： 1．5 种10株皮肤癣菌对水提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子、乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肽子的MIC值范围分别在0.3125～2.5mg/ml，0.625～1.25mg/ml，1.25～≥5.0mg/ml，>5.0mg/ml，≥5.0mg/ml，>5.0mg/ml，0.156～1.25mg/ml，0.156～1.25mg/ml，0.156～2.5mg/ml ，0.039-0.156mg/ml ， 0.0195～0.156 mg/ml, 0.625～2.5mg/ml；3株白念珠菌MIC值范围分别在0.625～1.25mg/ml，≥5.0mg/ml，2.5～5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml。1.25mg/ml，0.625～1.25mg/ml，0.3125～0.625mg/ml，≥2.5mg/ml，≥2.5mg/ml，≥2.5mg/ml；3株糠秕马拉色菌MIC值范围分别在0.625～1.25mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，1.25mg/ml，>2.5mg/ml，>2.5mg/ml，>2.5mg/ml，≥2.5mg/ml，>2.5mg/ml。 2.5种10株皮肤癣菌对水提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子、乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子的MFC值范围分别在2.5～≥5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，1.25～>/2.5 mg/ml，>2.5mg/ml，>2.5mg/ml，>2.5mg/ml，0.078～0.3125 mg/ml，>2.5mg/ml；3株白念珠菌MFC值范围分别在>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>5.0mg/ml，>2.5mg/ml，>2.5mg/ml，0.625～2.5mg/ml，>2.5mg/ml.>2.5mg/ml，>2.5mg/ml；3株糠秕马拉色菌对水提中药成分MFC值范围均为>5.0mg/ml；对乙醇提中药成分MFC值范围均为 >2.5mg/ml。 3.扫描电镜观察结果：分别用2.5mg/ml水提黄连溶液和0.31 25mg/ml乙醇提蛇床子溶液与红色毛癣菌作用2小时、8小时、24小时表现出菌丝与孢子的连续性破坏过程。 结论： 1.水提黄连、黄柏、土槿皮、蛇床子对皮肤癣菌有抑菌作用、水提黄连、黄柏、土槿皮对白念珠菌有抑菌作用、水提黄连对糠秕马拉色菌有抑菌作用；乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肷f对皮肤癣菌均有抑菌作用、乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、蛇床子对白念珠菌有抑菌作用、乙醇提黄连对糠秕马拉色菌有抑菌作用。 2.水提黄连、乙醇提黄连和蛇床子对皮肤癣菌有杀菌作用：土梅皮水提和乙醇提取成分对白念珠菌均有杀菌作用。

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讨论

结论

参考文献

综述 真菌耐药机制及抗真菌治疗的研究进展

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