Ezrin、E-cadherin、paxillin和整合素β1在皮肤鳞状细胞癌中表达的研究

摘要

皮肤的鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)是起源于角质形成细胞或附属器鳞状上皮细胞的恶性肿瘤,是最常见的皮肤恶性肿瘤之一,具有侵袭性,易于发生临近或远隔转移,尤其转移到重要的器官,从而危及生命。该病的发生、侵袭和转移机制目前仍不十分清楚,因此研究SCC侵袭和转移的机理,对于肿瘤的预防和治疗具有重要意义。
　　 Ezrin是将细胞膜蛋白(CD-44、E-cadherin、ICAM-1)与肌动蛋白-细胞骨架连接起来的桥接蛋白,具有维持细胞形态和运动、连接粘附分子及调节信号转导等功能。目前研究发现,其主要通过与肿瘤细胞表面黏附分子发生作用来影响肿瘤的分化、侵袭性和转移;E-cadherin是一种介导同种细胞互相黏附的钙依赖性跨膜糖蛋白,维持上皮细胞的形态和组织结构的完整性,其低表达与恶性肿瘤的侵袭和转移有着密切的联系;Paxillin是一种主要定位于粘着斑且与细胞黏附相关的磷酸蛋白,通过磷酸化调节。Paxillin参与细胞的黏附和迁移。已发现其与多种肿瘤的恶性生物学特征有关;整合素β1(integrin D1,INTβ1)是一类介导细胞与细胞外基质及细胞与细胞间黏附的细胞黏附分子受体,它参与肿瘤转移的多个环节,在肿瘤转移中发挥重要作用。
　　 目的:上述四种因子在皮肤肿瘤领域的研究并不多见。为探讨Ezrin、E-cadherin、paxillin和INTβ1在SCC中的表达情况,本文采用免疫组织化学SP法检测了30例SCC和10例正常皮肤组织中四种蛋白的表达,研究它们与皮肤恶性肿瘤侵袭和转移的关系,为皮肤肿瘤转移机制提供理论依据。
　　 方法:应用免疫组化SP法检测30例皮肤鳞状细胞癌组织及10例正常皮肤组织中的Ezrin蛋白、E-cadherin蛋白、Paxillin蛋白和INTβ1的表达。
　　 结果:
　　 1.Ezrin、E-cadherin、paxillin和INTβ1在正常皮肤中的表达情况1.1 Ezrin在正常表皮的细胞浆中呈强阳性表达,阳性率为100％(10/10),在汗腺、皮脂腺和毛囊中的阳性表达率分别为87.5％(7/8)、12.5％(1/8)和12.5％(1/8)。
　　 1.2 E-cadherin在正常表皮的细胞核和细胞浆中呈强阳性表达,阳性率为100％(10/10),在汗腺中也呈强阳性表达(100％,10/10),在皮脂腺和毛囊中不表达(0,0/10)。
　　 1.3 Paxillin在正常表皮和毛囊中不表达(0,0/10),在汗腺(100％,10/10)和皮脂腺(100％,10/10)中呈强阳性表达。
　　 1.4 INTβ1在正常表皮的细胞核和细胞浆中呈弱阳性表达,阳性率为10％(1/10),在汗腺(100％,10/10)以及毛囊10％(1/10)中呈强阳性表达,在皮脂腺中不表达(0,0/10)。
　　 2.Ezrin、E-cadherin、paxillin和INTβ1在SCC中的表达情况
　　 2.1 Ezrin在SCC“正常”表皮的细胞浆中呈中等强度阳性表达,阳性率60％(18/30),在汗腺(81.82％,9/11)、皮脂腺(100％,6/6)和毛囊(75％,3/4)中呈强阳性表达,在癌细胞的细胞浆中呈中等强度阳性表达,在细胞膜中也有表达,阳性率为56.67％(17/30)。
　　 2.2 E-cadherin在SCC“正常”表皮的细胞核和细胞浆中呈中等强度阳性表达,阳性率为33.33％(10/30),在汗腺和皮脂腺中呈强阳性表达,阳性率分别为87.5％(7/8),100％(4/4)在毛囊中不表达(0,0/9),在癌细胞中的阳性表达率为13.33％(4/30),表达部位在细胞浆。
　　 2.3 Paxillin在SCC“正常”表皮的细胞核中呈强阳性表达,阳性率为73.33％,在汗腺(100％,14/14)、皮脂腺(100％,11/11)和毛囊(80％,4/5)中呈强阳性表达,在癌细胞的细胞核中呈强阳性表达,阳性率为70％(21/30)。
　　 2.4 INTβ1在SCC“正常”表皮中的细胞核和细胞浆中呈强阳性表达,阳性率73.33％(22/30),在汗腺(100％,6/6)、皮脂腺(100％,9/9)和毛囊(100％,5/5)中也呈强阳性表达,在癌细胞的细胞核、细胞浆和细胞膜都可见到整合素β1的阳性表达,阳性率为66.67％(20/30)。
　　 3.Ezrin、E-eadherin、paxillin和INTβ1在正常皮肤和SCC中表达情况的对比分析
　　 3.1 Ezrin在正常表皮和SCC的“正常”表皮中都表达于细胞浆,都呈强阳性表达,阳性率分别为100％(10/10)和60％(18/30),阳性率有显著性差异(X2=5.71,P＜0.05):Ezrin在癌细胞中的阳性表达率为56.67％(17/30),也主要表达于细胞浆,与在正常表皮细胞中的表达差异有统计学意义(x2=6.42,P＜0.05);Ezrin在正常皮肤和SCC的汗腺中表达情况十分接近,阳性率分别为87.5％(7/8)和81.82％(9/11),差异无显著性(x2=0.11,P＞0.05),在鳞癌皮脂腺(100％,6/6)和毛囊(75％,3/4)中的表达显著高于在正常皮肤中皮脂腺(12.5,1/8)和毛囊(12.5,1/8)中的表达,x2值分别为10.5.4.69,P均＜0.05。
　　 3.2 E-cadherin在正常表皮和SCC“正常”表皮的细胞核和细胞浆中都呈阳性表达,阳性率分别为100％(10/10)、33.33％(10/30),差异有显著统计学意义(x2=13.33,P＜0.01);E-cadherin在癌细胞浆中呈弱阳性表达,阳性率为13.33％(4/30),与在正常表皮中的表达差异有显著统计学意义(x2=24.76,P＜0.01);E-cadherin在正常皮肤和SCC的毛囊中均不表达,在正常皮肤汗腺(100％,10/10)和SCC的汗腺(87.5％,7/8)中的表达无显著性差异(x2=1.32,P＞0.05),在SCC皮脂腺(100％,4/4)中表达显著高于在正常皮肤皮脂腺(0,0/10)中的表达(x2=14,P＜0.01)。
　　 3.3 Paxillin在正常表皮中不表达而在SCC的“正常”表皮中呈强阳性表达(73.33％,22/30),两者的表达差异显著,具有统计学意义(x2=16.30,P＜0.01):Paxillin在癌细胞中的阳性表达率为70％(21/30),与在正常表皮细胞中的表达差异有统计学意义(x2=14.74,P＜0.01):Paxillin在正常皮肤和SCC的汗腺与皮脂腺中都呈阳性表达,阳性率均为100％,在正常皮肤的毛囊中不表达(0,0/10)而在SCC的毛囊中强阳性表达80％(4/5),差异显著(x2=10.91,P＜0.01)。
　　 3.4 INTβ1在正常表皮和SCC“正常”表皮中的阳性表达率分别为10％(1/10)和73.33％(22/30),表达差异有统计学意义(x2=12.31,P＜0.01);INTlβ1在癌细胞中的阳性表达率为66.67％(20/30),与在正常表皮细胞中的表达差异有统计学意义(x2=9.66,P＜0.01);INTβ1在正常皮肤和SCC中,汗腺的阳性表达率均为100％(10/10,7/7),毛囊的阳性表达率分别为10％(1/10)和80％(4/5),差异显著(x2=7.35,P＜0.01),皮脂腺的阳性表达率分别为0(0/10)和100％(11/11),差异显著(x2=21,P＜0.01)。
　　 4.Ezrin、E-cadherin、paxillin和INTβ1表达的相关性分析
　　 4.1在SCC的癌细胞中,Ezrin和E-cadherin的表达呈显著正相关r=0.5(P＜0.01),Paxillin和E-cadherin的表达呈显著负相关r=-0.56(P＜0.01),INTβ1与E-cadherin的表达也呈显著负相关r=-0.52(P＜0.01)。
　　 4.2在SCC的癌细胞中,Ezrin与Paxillin,Ezrin与INTβ1,Paxillin与INTβ1的表达无统计学相关性(x2值分别为0.5;0.24,0,P＞0.05)。
　　 结论:
　　 1.Ezrin在正常表皮中的表达均高于在SCC的“正常”表皮和癌细胞中的表达(P＜0.05),正常皮肤的汗腺和SCC的汗腺之间的表达无显著性差异(P＞0.05),在SCC皮脂腺和毛囊中的表达分别高于在正常皮肤皮脂腺和毛囊中的表达(P＜0.05)。
　　 2.E-cadherin在正常表皮中的表达均高于在SCC“正常”表皮和癌细胞中的表达(P＜0.05),在正常皮肤和SCC的毛囊中均无表达,在正常皮肤和SCC的汗腺中表达无显著性差异(P＞0.05),在SCC皮脂腺中的表达高于在正常皮肤皮脂腺中的表达(P＜0.05)。
　　 3.paxillin在正常表皮中无表达而在SCC“正常”表皮和癌细胞中高表达,在正常皮肤的毛囊中不表达,在SCC的毛囊中高表达,在正常皮肤和SCC的汗腺和皮脂腺中均呈高表达,阳性率为100。
　　 4.INTβ1在正常表皮中的表达均低于在SCC“正常”表皮和癌细胞中的表达(P＜0.05),在正常皮肤和SCC中,汗腺的表达率均为100％,在正常皮肤毛囊中的表达低于在SCC毛囊中的表达(P＜0.05),在正常皮肤皮脂腺中无表达而在SCC皮脂腺中高表达(P＜0.05)。
　　 5.在皮肤SCC中,Ezrin与E-cadherin的表达呈显著正相关(P＜0.05),paxillin与E-cadherin和INTβ1与E-cadherin的表达均呈显著负相关(P＜0.05);Ezrin与paxillin、Ezrin与INTβ1和paxillin与INTβ1的表达无统计学相关性(P＞0.05)。