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【6h】

AMFR在不同转移潜能的肺癌细胞株的表达及其对细胞侵袭力影响

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目录

声明

摘要

材料与方法

一、材料

1、主要试剂

2、主要仪器

3、细胞株来源

二、方法

1、细胞培养

2、免疫印迹实验

3、Western Blot检测95-C细胞中AMFR的表达

4、Western Blot检测95-D细胞中AMFR的表达

5、酶联免疫吸附试验检测AMF

6、Transwell细胞侵袭实验

7、结晶紫染色(crystal violet)

结果

结论

参考文献

综述

致谢

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摘要

目的:
   目前研究表明,肿瘤的侵袭与转移是导致肿瘤患者死亡的最重要的原因,这也是恶性肿瘤最基本的生物学特征。探究恶性肿瘤细胞移动的原因,其中主要是由肿瘤细胞分泌的细胞因子即自分泌运动因子(AMF)以自分泌的形式与分泌细胞自身表面的自分泌运动因子受体(AMFR)相结合。正是这两者的结合直接导致了肿瘤细胞的运动。本文意在研究自分泌运动因子受体在不同转移潜能的肺癌细胞株的表达及其影响。
   方法:
   1、采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)来分析95-C、95-D细胞中AMFR蛋白水平的表达;
   2、采用酶联免疫吸附试验检测95-C、95-D细胞中AMF水平的差异;
   3、采用transwell细胞侵袭实验,分为4个组别,检测培养24h后的95-C细胞、95-D细胞、加入95-D培养基的95-C、加入95-D培养基及AMFR抗体的95-C细胞体外侵袭能力的变化。
   结果:
   1、蛋白水平,95-D细胞中AMFR的表达量较95-C高(P<0.05),具有统计学意义;
   2、95-D细胞中AMF的表达量较95-C高(P<0.05),具有统计学意义;
   3、95-C细胞侵袭力较95-D细胞低(P<0.05),加入95-D培养基及AMFR抗体的的95-C的侵袭力较只加入95-D培养基的95-C细胞低(P<0.05),且与95-D细胞共培养可以提高95-C细胞的侵袭能力。
   结论:
   1、高转移潜能肺癌细胞较低转移潜能肺癌细胞的AMF/AMFR表达水平高;
   2、AMF/AMFR的高表达能促进肺癌细胞侵袭。

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