磷脂酶A催化水解大豆浓缩磷脂的研究

摘要

磷脂是构成细胞膜的主要成分之一，是重要的生命基础物质。磷脂又是一种天然两性表面活性剂。由于其表面活性和生理活性，磷脂广泛应用于食品、医药、化妆品、农业等领域。随着油脂科学、病理学、药理学、营养学等科学的发展，磷脂的改性受到越来越多的关注，其中又以反应条件温和，副产物少，酶作用部位准确的酶法改性磷脂最具意义和发展潜力。 本文以大豆浓缩磷脂为原料，以磷脂酶A1为酶试剂对大豆浓缩磷脂进行水解改性研究。对磷脂酶A1水解大豆浓缩磷脂的反应体系进行了选择。研究发现，均质转速的不同，水解效果差别显著；非静置反应条件下比静置反应条件下，磷脂水解效果显著提高；有机溶剂存在条件下，反应速率较快，水解产物酸值比水相反应条件下略高，水相反应条件下同样可以达到较好的水解效果，流程简化且产物安全性好；随着钙离子浓度的增加，酸值逐渐减小，磷脂酶A1没有表现出对钙离子浓度的依赖性。确定了磷脂酶A1催化水解大豆浓缩磷脂的反应体系为：均质转速1000r/min，不添加钙离子的非静置水相反应体系。 通过单因素实验，研究了加酶量，底物比(v/w)，反应温度，反应时间对磷脂水解的影响。确定了加酶量400～600μl，底物比10～14，反应温度35～45℃，反应时间9～11h的范围内，水解效果较好，产物酸值较高。 在单因素实验基础上，基于响应面分析法，以酸值为磷脂水解的响应指标，采用Box-Behnken中心组合实验设计，建立的二次回归方程为：AV=127.1+1.975X1+2.075X2+0.808334X3+1.375X4-1.091.67X12-4.79166X22-5.26667X32-2.04166X42+0.449989X1X2+0.699998X1X3-0.125X1X4+0.299998X2X3-0.824999X2X4-0.275003X3X4。分析结果显示底物比和反应温度对酸值的影响最为显著，因素影响显著性顺序：底物比＞反应温度＞反应时间＞加酶量。研究了任意两因素的交互作用对磷脂水解的影响。实验范围内得到最佳的工艺条件是：加酶量590μl，底物比12.4，反应温度40.4℃，反应时间10.3h，此时预测值为128.9mgKOH/g，该条件下验证实验得到的酸值为128.5mgKOH/g，与预测值拟合较好，该回归方程为磷脂酶A1水解大豆浓缩磷脂提供了一个合适的模型。

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引言

1文献综述

1.1磷脂简介

1.2磷脂的改性

1.3国内外磷脂研究和生产概况

2实验部分

2.1实验材料和仪器

2.2原料磷脂理化指标的测定

2.3实验原理

2.4实验方法

2.5实验体系的确定

2.6单因素实验

2.7基于响应面分析法优化工艺条件

3实验结果与讨论

3.1原料大豆磷脂的理化指标

3.2实验体系的确定

3.3单因素实验

3.4响应面分析法优化磷脂酶A1催化水解大豆浓缩磷脂的工艺条件

3.5最佳工艺条件的确定

结论

参考文献

攻读硕士学位期间发表学术论文情况

致谢