声明
1 绪论
1.1 多形汉逊酵母简介
1.1.1 多形汉逊酵母的特点
1.1.2 多形汉逊酵母在基因编辑及蛋白表达中的应用
1.1.3 多形汉逊酵母在发酵中的应用
1.2 甲基营养型微生物简介
1.3 甲醇简介
1.3.1 甲醇的性质
1.3.2 甲醇的合成
1.3.3甲醇的应用
1.4 响应面优化法
1.4.1 响应面优化法的定义及特点
1.4.2 响应面优化法的应用
1.5 维生素及氨基酸对细胞生长的促进作用
1.5.1 维生素的性质及功效
1.5.2 氨基酸在代谢中的作用
1.6 本课题研究意义与目的
2 优化以甲醇为碳源的基础盐培养基
2.1 材料与方法
2.1.1 主要仪器
2.1.2 材料
2.1.3 菌种培养
2.1.4 测定细胞干重与吸光度的标准曲线
2.2 结果与讨论
2.2.1 优化添加的氨基酸的种类
2.2.2 优化添加的维生素的种类
2.2.3 Box-Behnken试验法优化添加的维生素的浓度
2.2.4 减少添加的维生素种类
2.2.5 验证添加生物素和维生素B1溶液的培养基
2.2.6 利用野生型汉逊酵母菌种验证优化后的最终培养基
2.2.7 优化后的甲醇培养基成本核算
2.2.8 吸光度与细胞干重标准曲线
2.3 本章小结
3 优化以葡萄糖为碳源的基础盐培养基
3.1 材料与方法
3.1.1 主要仪器
3.1.2 材料
3.1.3 菌种培养
3.1.4 测定吸光度与细胞干重的标准曲线
3.2 结果与讨论
3.2.1 优化添加的维生素的种类
3.2.2 优化添加的生物素的浓度
3.2.3 优化添加的氨基酸的种类
3.2.4 Box-Behnken试验法优化添加的氨基酸的浓度
3.2.5 尝试继续减少添加的氨基酸种类
3.2.6 验证最终优化后的葡萄糖培养基
3.2.7 利用野生型汉逊酵母菌种验证优化后的葡萄糖培养基
3.2.8 优化后的葡萄糖培养基成本核算
3.2.9 葡萄糖培养基的吸光度和细胞干重的标准曲线
3.3 本章小结
4 优化后的培养基对细胞中PDH和PC酶活力的促进作用研究
4.1 材料与方法
4.1.1 主要仪器
4.1.2 材料
4.1.3 丙酮酸脱氢酶活性的测定方法
4.1.4 丙酮酸羧化酶活性的测定方法
4.2 结果与讨论
4.2.1 以甲醇为碳源的培养基中丙酮酸脱氢酶活性的测定
4.2.2 以甲醇为碳源的培养基中丙酮酸羧化酶活性的测定
4.2.3 以葡萄糖为碳源的培养基中丙酮酸羧化酶活性的测定
4.3 本章小结
结论
参考文献
致谢
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