肿瘤细胞放射敏感性与放射诱导凋亡之间关系的研究

摘要

目的： 观察放射线诱导人小细胞型肺癌细胞株(NCI-H446)和人宫颈鳞癌细胞株(Siha)和人胃癌细胞株(SGC-7901)的细胞凋亡，并探讨其与放射敏感性之间的关系，为临床肺癌、宫颈癌及胃癌放射治疗提供有价值的实验资料。 方法： 以人小细胞型肺癌细胞株(NCI-H446)和人宫颈鳞癌细胞株(Siha)和人胃癌细胞株(SGC-7901)为实验对象，设空白对照组，NCI-H446实验组，Siha实验组以及SGC-7901实验组，设定放射吸收剂量为1 Gy、2 Gy、3 Gy、5 Gy、7 Gy、10 Gy，采用平板克隆分析法，计算各组细胞存活分数，“多靶单击数学模型”拟合细胞存活曲线，根据D0值、Dq值等放射生物学参数，观察比较3种细胞系之间的放射敏感性。 利用琼脂糖凝胶电泳检测放射诱导细胞凋亡的特有的梯状条带以及利用电镜观察放射诱导细胞凋亡的形态。 以流式细胞仪磷脂酰丝氨酸V/PI双重染色法观察空白对照组，NCI-H446实验组、Siha实验组和SGC-7901实验组细胞凋亡率的变化与放射敏感性之间的关系。 结果： 1、平板克隆分析法结果显示：在相同剂量下，3种细胞存活分数大小依次是NCI-H446＜Siha＜SGC-7901，三种细胞株存活分数随着照射剂量的增加而降低，呈良好的剂量-效应关系。 2、琼脂糖凝胶电泳检测到放射诱导细胞凋亡的特有的梯状条带。 3、透射电镜观察到放射诱导细胞凋亡的形态(凋亡小体等)。 4、流式细胞仪结果显示：放射能够诱导细胞凋亡，三种细胞株细胞凋亡指数随着照射剂量的增加而增加，呈良好的剂量-效应关系。在相同剂量下，放射诱导的细胞凋亡峰值依次为NCI-H446＞Si ha＞SGC-7901。 结论： 放射线能够诱导人小细胞型肺癌细胞株(NCI-H446)、人宫颈鳞癌细胞株(Siha)和人胃癌细胞株(SGC-7901)的凋亡，并且三种细胞株细胞凋亡指数随着照射剂量的增加而增加，呈良好的剂量-效应关系。三种细胞株的放射敏感性大小依次是NCI—H446＞Siha＞SGC-7901。

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论文说明：外文缩略语表

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引言

1.材料

1.1实验研究对象

1.2主要实验仪器

1.3主要实验试剂

1.4培养基和常用实验试剂配制

2方法

2.1细胞复苏

2.2细胞传代培养

2.3平板克隆形成法检测放射线对细胞的杀伤作用及放射敏感性

2.4琼脂糖凝胶电泳检测放射诱导细胞凋亡的特有的梯状条带

2.5电镜观察放射诱导细胞凋亡的形态

2.6流式细胞仪检测放射诱导的细胞凋亡及不同细胞的放射敏感性

2.7统计方法

3结果

(1) 平板克隆形成法检测的结果：

(2) 琼脂糖凝胶电泳结果：

(3) 透射电镜观察的结果：

(4)、三种细胞株不同剂量、不同时间点的凋亡率结果：

4.讨论

结论

致谢

参考文献

文献综述 细胞凋亡与肿瘤放射敏感性

攻读学位期间的研究成果