IGF-Ⅰ、IGFBP-1、IGF-IR在Ishikawa细胞模拟的正常及PCOS子宫内膜的表达及意义

摘要

目的： 通过于Ishikawa细胞培养基中添加外源性β-雌二醇（E2）和孕酮（P）模拟分泌中期子宫内膜，予添加不同浓度的胰岛素（INS）模拟正常及多囊卵巢综合征（PCOS）合并胰岛素抵抗/高胰岛素血症（IR/HI）患者子宫内膜，观察Ishikawa细胞在不同浓度胰岛素作用下胰岛素样生长因子（IGF-I）mRNA、胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）mRNA、IGF-I受体（IGF-IR）mRNA的表达及细胞的生长情况，以研究胰岛素对分泌中期子宫内膜IGF-I、IGFBP-1、IGF-IR表达及子宫内膜上皮细胞生长情况的影响，以期进一步探讨PCOS合并IR/HI患者胚胎种植率低，流产率高可能存在的原因，为提高多囊卵巢综合征患者临床妊娠率提供治疗思路。 方法： Ishikawa细胞培养液中添加β-雌二醇（E2）200pg/mL和孕酮（P）20ng/mL模拟分泌中期，再分空白对照组、对照组、实验组及阳性对照组4组分别予0μU/mL、10μU/mL、30μU/mL、100μU/mL胰岛素于细胞培养基中，培养24小时后通过RT-PCR法检测Ishikawa细胞IGF-ImRNA、IGFBP-1、IGF-IRmRNA的表达，MTT法观察细胞的生长情况。 结果： 1.4组中IGF-ImRNA、IGFBP-1mRNA、IGF-IRmRNA表达均为阳性。组间IGF-ImRNA、IGFBP-1mRNA的表达分别比较有统计学意义（P<0.001，P<0.0001），IGF-ImRNA随胰岛素浓度的升高，表达量上升；IGFBP-1mRNA随胰岛素浓度的升高，表达量下降。 2.实验组与对照组IGF-ImRNA、IGFBP-1mRNA表达比较有统计学意义（P<0.0001，P<0.0001），而IGF-IRmRNA表达无统计学意义（P>0.05）。 3.Ishikawa细胞在不同浓度胰岛素作用下生长改变有统计学意义（P<0.005），细胞随胰岛素浓度的升高而呈增殖状态。 4.实验组Ishikawa细胞IGF-ImRNA与细胞生长酶联免疫吸收值A值呈正线性相关（Pearson积差相关系数r=0.672，P<0.001），实验组IGFBP-ImRNA与A值比较呈负线性相关（r=0.618，P<0.001）。 结论： 1.模拟PCOS合并IR/HI患者分泌中期子宫内膜上皮细胞IGF-I、IGFBP-1表达较正常育龄妇女存在改变，IGF-ImRNA表达升高，IGFBP-1mRNA表达降低可能使PCOS患者子宫内膜容受性降低。 2.模拟PCOS合并IR/HI患者分泌中期子宫内膜上皮细胞细胞生长状态也较正常育龄妇女存在改变，高浓度胰岛素使细胞增殖明显，影响分泌期子宫内膜腺上皮形态学改变也可能使PCOS患者子宫内膜容受性降低。 3.模拟PCOS合并IR/HI患者子宫内膜上皮细胞IGF-I、IGFBP-1基因表达的改变及其对细胞生长状态可产生相互影响，进而使分泌中期细胞生长因子表达异常加重，细胞的增殖与凋亡发生紊乱，进一步使PCOS患者子宫内膜容受性降低。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章引 言

第2章材料与方法

2.1实验对象

2.2实验分组

2.3主要仪器

2.4主要试剂

2.5实验方法

2.6统计学处理

第3章结果

3.1 Ishikawa细胞雌、孕激素受体表达情况

3.2不同浓度胰岛素作用下Ishikawa细胞IGF-I mRNA的表达情况

3.3不同浓度胰岛素作用下Ishikawa细胞IGFBP-1 mRNA的表达情况

3.4不同浓度胰岛素作用下Ishikawa细胞IGF-IR mRNA的表达情况

3.5不同浓度胰岛素作用Ishikawa细胞生长情况

3.6 实验组Ishikawa细胞IGF-I mRNA、IGFBP-1 mRNA、与细胞生长情况相关性分析结果

第4章讨论

4.1 正常子宫内膜IGF-I、IGF-IR、IGFBP-1的表达及意义

4.2 PCOS合并IR／HI患者子宫内膜上皮细胞IGF-I、IGFBP-1、IGF-IR mRNA表达变化

4.3胰岛素对子宫内膜细胞生长的影响

4.4 IGF-I、IGFBP-1、IGF-IR细胞生长

4.5 PCOS合并IR/HI与胚胎种植

第5章结论

致 谢

参考文献

综 述(一)胰岛素样生长因子系统对卵巢生理和胚胎种植的影响

综 述(二)IGF-I与IGFBP-1对多囊卵巢综合征的影响

攻读学位期间的研究成果