人或哺乳动物正常上皮细胞的培养基、培养方法、正常上皮细胞及其应用

摘要

本发明涉及一种人或哺乳动物正常上皮细胞的培养基、原代分离培养、传代培养、气-液3D培养及基质胶3D培养方法，以及上述培养基、培养方法所生成的正常上皮细胞及其在毒理学评价系统中的应用，培养基成分包括：DMEM与Ham’s F-12NUTRIENT MIX按体积比3:1混合的培养基，同时添加4-6％胎牛血清、1-3nM triiodothyronine,0.4-0.65％insulin-transferrin-selenium试剂、4-6μg/ml transferrin、9-11ng/mL表皮生长因子、0.3-0.5μg/mL氢化可的松、0.5-1.5nM霍乱毒素、0.4-0.6μg/mL两性霉素B、35-45μg/mL庆大霉素、45-55nM calpeptin、35-45ng/ml重组人IL-1RA及3ug/ml重组人R-Spondin-1。发明提供的一种培养基，可用于分离培养、传代培养人或哺乳动物多种组织来源的正常上皮细胞，于体外快速增殖并建立细胞系，为正常二倍体细胞，应用于人或哺乳动物的毒理学评价系统。