实时荧光定量PCR检测法在孕妇弓形虫感染检测中的优势及临床应用

摘要

目的:弓形虫病是一种世界性流行的人兽共患病,是由细胞内专性寄生性原虫--刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染引起的全身性疾病。该虫能寄生于包括人在内的100多种脊椎类动物的有核细胞内,引起疾病和死亡。在人类,它的危害包括孕妇感染弓形虫后胚胎的先天性危害和后天性危害,可能造成胚胎的死亡、畸形和流产。因此,找到一种快速准确的方法,为弓形虫的检测提供诊断价值,就显得至关重要。
　　 方法:收集2008年7月至2009年12月共一年半时间内赣州地区四家大型医院(赣南医学院第一附属医院、赣州地区人民医院、赣州市立医院、赣州市妇幼保健院)所有首次进行弓形虫检测的800例孕妇血液,用ELISA方法和实时荧光定量PCR检测法两种方法进行检测,通过比较性研究了解实时荧光定量PCR检测法在孕妇弓形虫感染检测中的优势及临床应用。
　　 结果:ELISA法:弓形虫IgM抗体阳性的有13例；弓形虫IgG抗体为阳性的有5例；弓形虫IgM抗体和IgG抗体均为阳性的有30例；弓形虫IgM抗体和IgG抗体均为阴性的有752例；阳性率为5.38％(43/800)。实时荧光定量PCR检测法:结果为阳性的标本有45例,结果为阴性的标本有755例,阳性率为5.63％(45/800)。两种方法的阳性率(检出率)做统计学分析,P＞0.05,无统计学意义。以实时荧光定量PCR法为标准,ELISA法的灵敏度为95.56％(43/45)。
　　 结论:实时荧光定量PCR检测方法在特异性及灵敏性方面都要优于ELISA法,操作也更为简便；但在试验过程中一定要规范操作,注意避免造成假阳性的各种因素。

目录

文摘

英文文摘

第1章 文献综述 弓形虫病的发病机制及临床上的主要检测方法

1.1 弓形虫的发病机制

1.1.1 弓形虫的生活史

1.1.2 弓形虫致病的相关抗原

1.1.3 弓形虫病的临床类型

1.2 临床上弓形虫的主要检测方法

1.2.1 病原检查

1.2.2 免疫诊断

1.2.3 聚合酶链反应(PCR)检测法

1.3 ELISA法在检测弓形虫抗体中的应用

1.4 实时荧光定量PCR检测法在弓形虫检测中的应用

参考文献

第2章 实时荧光定量PCR检测法对孕妇弓形虫感染的检测分析

2.1 引言

2.1.1 临床上检测弓形虫的常用方法

2.1.2 ELISA法对于弓形虫抗体的检测

2.1.3 实时荧光定量PCR检测法对于弓形虫DNA的检测

2.1.4 本项目研究的目的和意义

2.2 实验材料与方法

2.2.1 实验材料

2.2.2 实验方法

2.3 实验结果与分析

2.3.1 结果判定的依据

2.3.2 实验结果的分析

2.4 讨论

2.4.1 ELISA法检测弓形虫抗体的优点及局限性

2.4.2 实时荧光定量PCR检测法在孕妇弓形虫感染检测中的优势及前景

参考文献

第3章 实时荧光定量PCR检测法对孕妇弓形虫检测阳性标本的追踪分析

3.1 引言

3.2 实验材料与方法

3.2.1 实验材料

3.2.2 实验方法

3.3 实验结果与分析

3.3.1 结果判定的依据

3.3.2 实验结果的分析

3.4 讨论

参考文献

第4章 小结

致谢