大鼠同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗急性肝衰竭的实验研究

摘要

目的：观察骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)移植对经CCL4诱导的急性肝衰竭大鼠的疗效。
　　 方法：⑴无菌条件下分离大鼠股骨骨髓，采用全骨髓贴壁筛选法培养并纯化其BMSCs，经免疫细胞化学法及流式细胞仪法检测其是否表达免疫表型CD29、CD44及CD34、CD45。⑵30只健康SD大鼠随机均分为3组：正常对照组、肝衰竭组和移植组。正常对照组不予任何处理，肝衰竭组和移植组均给予一次性腹腔注射50％四氯化碳石蜡油溶液(12 mL/kg)以建立急性肝衰竭模型，然后分别经鼠尾静脉注射生理盐水和等量骨髓间充质干细胞。最后观察三组大鼠存活率、肝功能及肝脏组织病理变化情况。
　　 结果：①免疫细胞化学染色法检测显示，P3代BMSCs CD29、CD44表达阳性，CD34、CD45表达阴性，阳性细胞表现为细胞膜呈棕色或棕褐色；流式细胞仪检测结果显示P3代BMSCs CD29、CD44高表达，阳性率分别为99.3％，99.6％；CD34、CD45低表达，阳性率分别为4.3％，17.1％。②大鼠存活率结果显示，CCL4所致肝衰竭鼠1周存活率为20％，BMSCs移植组生存率为70％，肝功能指标中ALT和AST相比，移植组明显低于肝衰竭组；肝脏组织病理学结果显示移植组肝细胞变性、坏死程度以及炎症细胞浸润程度明显轻于肝衰竭组。
　　 结论：⑴利用全骨髓贴壁筛选法培养可获得纯度高、细胞形态均一BMSCs。⑵BMSCs移植能显著改善急性肝衰竭大鼠肝功能、减轻肝脏坏死程度及提高其生存率。