江西省中华鳖种持状况调查及群体遗传多样性

摘要

中华鳖是我国重要经济特种水产品之一,具有重要的营养价值和药用价值。迄今对中华鳖的研究多集中在形态、养殖性能及疾病等方面,对其种质资源的研究较少。本文对江西省中华鳖的主要养殖企业分布、种质情况及养殖模式等进行了调查,同时测量了不同养殖企业的6个中华鳖养殖类群的13项形态指标,从形态数据方面分析了不同养殖类群的种质；另外,使用了RAPD和ISSR两种方法对其中5个中华鳖群体进行了遗传多样性分析,并且运用SCAR技术对5个中华鳖群体进行了特异性分子标记研究。结果如下:
　　 (1)通过对江西省中华鳖种质状况及养殖方式的调查,获得了以下结果:全省各地均有养殖,有一定规模的养殖企业主要分布于南丰县、黎川县、玉山县、永修县、余干县、进贤县和弋阳县等地；主要的养殖品系有鄱阳湖中华鳖、广东绿卡中华鳖、日本品系中华鳖、黄河中华鳖、台湾鳖、当地品种以及杂交品种等；采用的养殖模式主要分为三种:常温养殖模式,控温高产养殖模式和生态化高产养殖模式；投喂的饵料主要是配合饲料、小鱼和小虾、鸡肝等；主要产品是种蛋、种苗和商品鳖。从形态方面分析,6个养殖类群种质的结果表明:玉山养殖类群系黄河中华鳖、日本品系中华鳖和台湾鳖的杂交种；余干养殖类群为鄱阳湖中华鳖,但推测其有广东绿卡中华鳖品系的混杂；进贤养殖类群是鄱阳湖中华鳖、广东绿卡中华鳖、日本品系中华鳖和黄河中华鳖等品系的混杂种；南丰养殖类群、黎川养殖类群和永修养殖类群是鄱阳湖中华鳖,但不排除有其他品系混杂的可能,其种质有待进一步研究。
　　 (2)对5个中华鳖群体的遗传多样性和特异性分子标记进行了初步研究。利用13个RAPD引物共检测到110个位点,其中多态位点为89个；8个ISSR引物共检测到50个位点,其中多态位点为33个。数据分析结果显示:RAPD获得总的多态位点为比例81％,不同群体的多态位点比例在33.64％～89.09％,ISSR获得总的多态位点比例为66％,不同群体的多态位点比例在32.00％～82.00％；两者的结果都是永修群体最高,日本群体最低。RAPD分析黎川群体、永修群体、黄河群体、广西群体和R本群体的群体内的遗传相似度,分别为0.7759、0.7064、0.8476、0.8585和0.8864;ISSR得到的结果分别为0.7528、0.7244、0.8749、0.8592和0.9150；两者的结果都是永修群体内的遗传相似度最低,而日本群体的遗传相似度最高。RAPD分析得到5个群体间的遗传距离在0.1300～0.5017之间,ISSR分析得到的结果在0.1046～0.2116之间。根据两种方法得到的遗传距离分别进行聚类分析表明:黎川群体和永修群体聚在一起,黄河群体和日本群体聚在一起；而关于广西群体的聚类,两种方法的结果不一样,RAPD将广西群体与黎川群体及永修群体聚在一起,而ISSR将广西群体与黄河群体及日本群体聚在一起。
　　 (3)对特异性片段进行切胶回收、转菌、测序和设计引物,成功转化得到4个RAPD-SCAR标记,分别命名为LC567、YX210、LC473和RB1341。在黎川群体中LC567、LC473和RB1341三个标记能够扩增得到相应的特异条带。在永修群体中YX210和LC473能够扩增得到相应的特异条带。在黄河群体中YX210和RB1341能够扩增得到相应的特异条带。在日本群体中LC473和RB1341能够扩增得到相应的特异条带；四个SCAR标记能够对5个中华鳖群体进行准确鉴别。