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14-3-3蛋白家族在卵巢子宫内膜异位囊肿中的表达及意义

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摘要

中英文缩略词对照表

第1章 引言

第2章 材料和方法

2.1 实验材料

2.1.1 标本来源

2.1.2 主要试剂和产地

2.1.3 主要仪器设备及产地

2.2 实验步骤

2.2.1 常用试剂的配制

2.2.2 卵巢子宫内膜异位囊肿异位子宫内膜组织及正常子宫内膜组织总RNA的提取

2.2.3 总RNA的定性及定量

2.2.4 RNA的逆转录反应(20μl体系)

2.2.5 聚合酶链式反应(PCR)

2.2.6 Western-blotting(免疫印迹)法检测卵巢子宫内膜异位囊肿异位子宫内膜组织中14-3-3蛋白的表达

第3章 实验结果

3.1 卵巢子宫内膜异位囊肿异位子宫内膜组织和正常子宫内膜组织14-3-3蛋白各亚型mRNA表达水平

3.2 14-3-3σ、ε、ζ亚型蛋白表达水平的改变

第4章 讨论

第5章 结论与展望

5.1 结论

5.2 进一步工作进展

致谢

参考文献

综述 14-3-3蛋白及其甲基化在人类疾病中的研究

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摘要

目的:研究14-3-3蛋白各亚型mRNA及蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿中的表达,探讨14-3-3蛋白与卵巢子宫内膜异位囊肿发生发展的关系。
  方法:取经病理组织学确诊卵巢子宫内膜异位囊肿患者的异位内膜与正常子宫内膜标本各30例,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织中14-3-3蛋白各亚型mRNA表达水平,对有表达差异的亚型通过Western-blotting进一步鉴定其蛋白表达水平。
  结果:14-3-3蛋白各亚型在卵巢子宫内膜异位囊肿异位子宫内膜组织和正常子宫内膜组织均有表达,且卵巢子宫内膜异位囊肿异位子宫内膜组织中14-3-3σ亚型mRNA表达明显下调(P<0.05);14-3-3ε、(ζ)两种亚型mRNA表达明显上调(P<0.01); Western-blotting进一步检测显示14-3-3σ亚型蛋白表达也明显下调(P<0.01);14-3-3ε、(ζ)两种亚型蛋白表达也明显上调(P<0.01)。
  结论:(1)14-3-3蛋白七种亚型在卵巢子宫内膜异位囊肿异位子宫内膜组织和正常子宫内膜组织中均有表达。(2)相对正常对照组织,卵巢子宫内膜异位囊肿组织中的14-3-3σ的mRNA和蛋白表达水平均降低,14-3-3ε和14-3-3(ζ)的mRNA和蛋白表达均明显升高。我们的结果表明14-3-3σ、ε、(ζ)三种蛋白亚型均可能与卵巢子宫内膜异位囊肿的发生发展相关。

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