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乙型肝炎病毒X蛋白在肝细胞癌中的表达及其与HBV DNA的关系及意义

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第1章 引言

第2章 HBxAg和HBcAg在肝癌和癌周组织中的表达

2.1 材料和方法

2.1.1 研究对象

2.1.2 主要试剂

2.1.3 主要仪器

2.2 实验方法

2.2.1 液体的配置

2.2.2 免疫组化检测癌组织HBxAg的表达

2.2.3 免疫组化检测癌周组织HBxAg的表达

2.2.4 免疫组化检测癌组织HBcAg的表达

2.2.5 免疫组化检测癌周组织HBcAg的表达

2.2.6 统计学处理

2.3 结果

2.3.1 肝组织中HBxAg和HBcAg的表达

2.3.2 HBxAg和HBcAg在肝组织中的分布

第3章 肝癌组织中HBxAg的表达与HBVDNA的关系

3.1 材料和方法

3.1.1 研究对象

3.1.2 主要试剂

3.1.3 主要仪器

3.2 实验方法

3.2.1 切片制备

3.2.2 液体的配置

3.2.3 免疫组化检测肝癌组织中HBxAg的表达

3.2.4 定量PCR检测肝癌组织中的HBVDNA

3.2.5 统计学处理

3.3结果

3.3.1 HBxAg在肝癌组织中的分布

3.3.2 肝癌组织HBxAg的表达和HBVDNA阳性的关系

第4章 讨 论

第5章 结 论

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述

参考文献

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摘要

肝细胞肝癌是世界上最常见的致死性恶性肿瘤之一。肝细胞肝癌的发生是一个由多基因参与、多步骤及多阶段的病理过程。肝癌的形成与众多因素有关,在我国乙型肝炎病毒感染是肝癌形成的主要原因。我国肝癌患者绝大部分存在过感染。在肝癌的发生和发展过程中,乙肝致癌的机制十分复杂,尚未完全明了。大量证据表明,乙肝病毒X基因在肝癌的形成中起重要的作用。
  近年来的研究显示,X基因与肝癌的形成密切相关。X基因是HBV DNA中最小的开放读码框,其编码的x蛋白是一种多功能蛋白,涉及肝癌形成的多个步骤。随着分子生物学先进技术的运用,人们对 X蛋白的反式激活功能、对 P53基因的影响、对相关信号传导通路的激活和对细胞增殖与凋亡的影响等方面的研究取得了众多进展。我国是乙型肝炎病毒高流行区,因此研究 X蛋白与肝癌的关系对于防治肝癌具有重要的理论和实际意义。
  第一部分 HBxAg和HBcAg在肝癌组织和癌周组织中的表达
  目的:探讨HBxAg和HBcAg在肝癌组织和癌周组织中的表达情况
  方法:取41例肝癌患者的肝组织,采用免疫组化法检测41例肝细胞癌患者的癌组织和癌旁组织中的HBxAg和HBcAg。
  结果:41例中HBxAg在肝癌组织和癌周组织中的表达阳性例数分别是33和37,差异无统计学意义(P>0.05)。在癌组织中,HBxAg和HBcAg表达的阳性率分别是80.4%(33/41)和29.2%(12/41);癌周组织HBxAg和HBcAg的表达阳性率分别是90.2%(37/41)和48.7%(20/41);差别均有统计学意义(P<0.05)。
  第二部分肝癌组织中HBxAg的表达与HBV DNA的关系
  目的:探讨肝癌组织中HBxAg的表达与HBV DNA的关系
  方法:取23例肝细胞癌患者的癌组织,采用免疫组化法检测癌组织中的HBxAg,采用实时定量PCR法检测癌组织的HBV DNA水平。
  结果:23例中HBxAg的检出率是73.9%,HBVDNA的检出率是82.6%, HBxAg的表达和HBVDNA阳性呈正相关(r=0.455,P<0.05)。
  结论:综合上述两部分的实验结果,X蛋白的表达在肝癌的发生中有一定的关系,与HBVDNA相互作用诱导肝癌的发生。

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