印尼蛇接骨草醇提取物对骨肉瘤细胞U2-OS恶性表型影响的体外研究

摘要

目的:
　　探讨印尼蛇接骨草95％醇提取物[Gynura procumbens(Lour.) MERR.Extract, GPE]在体外对骨肉瘤细胞U2-OS增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。
　　方法:
　　通过不同的药物浓度(分别为5、10、20、40、80、160μg/ml)的GPE作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS24 h、48 h和72 h,MTT法检测骨肉瘤细胞U2-OS增殖的情况;流式细胞仪检测骨肉瘤细胞U2-OS凋亡的情况;Wound healing(划痕愈合)实验和Transwell侵袭实验检测骨肉瘤细胞U2-OS迁移、侵袭力的变化。
　　结果:
　　1不同浓度的GPE(5、10、20、40、80、160μg/ml)分别作用于骨肉瘤细胞U2-OS24 h、48 h和72 h后,细胞的增殖受到不同程度的抑制,随着GPE药物浓度的增加抑制率增大,且作用的时间越长抑制率也越大。
　　2不同浓度的GPE(10、20、40、80μg/ml)分别作用于骨肉瘤细胞U2-OS24 h后,凋亡率依次分别为5.5%、7.6%、24.7%和37.94%,高于正常对照组的0.18%(p<0.05)。
　　3经40μg/ml GPE作用24 h的平均细胞迁移率(33±3)%和穿膜细胞数(18±2)个/视野,小于未经 GPE处理组的平均细胞迁移率(66±2)%和穿膜细胞数(46±2)个/视野(p<0.05)。
　　结论:
　　印尼蛇接骨草95%醇提取物能在体外抑制骨肉瘤细胞U2-OS的增殖、诱导其凋亡,并且能抑制其迁移和侵袭,呈时间-剂量依赖性,有望成为一种新型的抗骨肉瘤药物。

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中英文缩略词表

第1章 前言

第2章 材料与方法

2.1 实验材料、试剂及仪器

2.1.1 细胞

2.1.2药物

2.1.3主要试剂

2.2 实验软件及仪器

2.2.1 常用实验软件

2.2.2 主要实验仪器及设备

2.3 主要试剂的配制

2.3.1 细胞培养技术相关试剂配制

2.3.2 MTT实验及流式细胞仪凋亡实验相关试剂配制

2.3.3 Transwell侵袭实验及Wound healing划痕愈合实验相关试剂配制

2.4 实验方法

2.4.1 实验分组

2.4.2 骨肉瘤细胞U2-OS的培养

2.4.3细胞增殖抑制实验

2.4.4细胞凋亡检测实验

2.4.5 GPE药物浓度的选择

2.4.6 Wound healing划痕愈合实验

2.4.7骨肉瘤U2-OS细胞侵袭实验

2.4.8统计处理

第3章 结果

3.1 GPE对骨肉瘤细胞U2-OS增殖作用的影响

3.2 GPE能诱导骨肉瘤细胞U2-OS的凋亡

3.3 GPE药物浓度的选择

3.4 GPE对骨肉瘤细胞U2-OS体外迁徙的影响

3.5 GPE对骨肉瘤细胞U2-OS体外侵袭的影响

第4章 讨论

第5章 结论与展望

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述