盐敏感高血压大鼠中主动脉平滑肌细胞BKCa通道电流的变化

摘要

目的：
　　观察感觉神经损伤给予高盐饮食后大鼠血压和主动脉平滑肌细胞（VSMC)大电导钙激活钾通道(BKCa)电流的变化，进而探讨盐敏感性高血压的发病机制。
　　方法：
　　（1）盐敏感高血压大鼠模型的建立新生SD雄性大鼠随机分为A、B两组（每组75只），在生后第1d、第2d，A组皮下注射辣椒辣素（50mg/kg），B组则注射同容积的对照液(含10％乙醇和10%吐温80的生理盐水)。哺乳期后再随机分成以下4组：正常对照组（0.5%NaCl正常盐饮食）30只；高盐组（4%NaCl高盐饮食但未注射辣椒素）30只；辣椒素组（出生后注射辣椒素但给予0.5%NaCl正常盐饮食）30只；模型组（出生后注射辣椒辣素并给予4%NaCl高盐饮食）30只。
　　（2）大鼠血压的测量采用尾动脉测压法，分别在第4、8、12、16周，定期测量大鼠血压。
　　（3）BKCa通道电流的记录分别于4、8、12、16周处死大鼠，用急性酶解分离法获得单个大鼠主动脉平滑肌细胞，采用全细胞膜片钳技术记录大鼠主动脉平滑肌细胞膜BKCa电流。
　　结果：
　　（1）模型组大鼠血压从第4周开始明显升高，且随着高盐时间延长逐渐增加，在第4、8、12、16周时，较其他各组血压均显着升高（P<0.01），其中，较正常对照组相比，血压值分别为（141±5.0vs.108±4.0）、（155±6.0vs.110±3.0）、（168±6.0vs.109±4.0）、（179±7.0vs.108±5.0）mmHg。在12、16周时，高盐组较其他各组血压差异有统计学意义（P<0.01）。
　　（2）模型组大鼠主动脉平滑肌细胞膜BKCa电流和电流密度随高盐时间延长而增大，第4、8、12、16周时，较其他各组BKCa电流密度均显着升高（P<0.01），其中，同正常对照组比较，电流密度值分别为（126.05±4.73vs.83.69±4.38）、（160.69±5.07vs.84.79±4.32）、（201.87±4.98vs.85.84±4.16）、（231.79±4.97vs.86.92±4.19）pA/pF。在12、16周时，高盐组较其他各组BKCa电流密度差异有统计学意义（P<0.01）。
　　结论：
　　（1）辣椒辣素处理的新生大鼠在高盐饮食后可建立起一种盐敏感性高血压模型。
　　（2）模型组大鼠BKCa电流密度随着高盐时间的延长及血压的升高而逐渐增加。
　　（3）BKCa电流密度增加引起血管的舒张不能抵消平滑肌细胞钙超载引起的肌源性收缩，可能是高血压的形成机制之一。

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中英文缩略词表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 实验动物

2.1.2主要实验仪器及试剂

2.1.3 记录细胞电流所需实验器材

2.1.4 实验溶液配制所需试剂

2.2 实验溶液的配制

2.2.1 溶液Ⅰ的配制：

2.2.2 溶液Ⅱ的配制：

2.2.3 BKCa内液的配制：

2.2.4 BKCa 细胞外液的配制：

2.2.5 酶液Ⅰ配制

2.2.6 酶液Ⅱ配制

2.3 实验方法

2.3.1 感觉神经损伤盐敏感性高血压大鼠模型的建立

2.3.2各组大鼠的血压测定

2.3.3 分离大鼠主动脉VSMC

2.3.4 膜片钳全细胞记录

2.4 统计学分析

第3章 实验结果

3.1 大鼠血压的动态变化

3.2 大鼠平滑肌细胞膜BKCa电流的变化

3.2.1在全细胞模式下

3.2.2 BKCa电流密度- 电压(I/V)曲线测定

3.2.3 高盐时间对模型组大鼠主动脉 VSMC膜 BKCa电流的影响

第4章 讨论

4.1 感觉神经损伤盐敏感性高血压模型的建立

4.2 急性分离大鼠主动脉平滑肌细胞

4.3 BKCa的结构、特性及在血管平滑肌中的作用

实验局限之处和还需解决的问题

第5章 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间研究成果

综述: 高血压与血管平滑肌细胞离子通道关系的研究进展