ERK1/2-P16(INK4a)信号通路、MDR1与子宫颈腺癌顺铂耐药的分子机制

摘要

目的：
　　研究P16(INK4a)-ERK1/2信号通路在宫颈腺癌细胞顺铂耐药MDR1（P-gp）形成过程中的机制。
　　方法：
　　1、荧光定量PCR检测HeLa及HeLa/DDP细胞中P16(INK4a)mRNA表达的差异。
　　2、CCK8(CellcountingKit-8)法检测转染P16(INK4a)过表达质粒pEX-2P16(INK4a)后HeLa/DDP细胞的增殖率，Transwell方法检测转染pEX-2P16(INK4a)后HeLa/DDP细胞迁移和侵袭的能力。
　　3、WesternBlot检测转染pEX-2P16(INK4a)后HeLa/DDP细胞中pERK1/2、ERK1/2及P-gp蛋白水平表达的变化。
　　结果：
　　1、qPCR结果显示：HeLa/DDP组中的P16(INK4a)mRNA表达水平较HeLa组明显降低(p<0.05)。
　　2、CCK8实验：pEX-2P16(INK4a)组增殖率明显低于HeLa/DDP组和pEX-2-空载组(p<0.05)，HeLa/DDP组相较于pEX-2-空载组细胞增殖率无明显差异（p>0.05）。
　　3、Transwell实验：pEX-2P16(INK4a)组相较于HeLa/DDP组及pEX-2-空载组其迁移及侵袭能力明显降低（p<0.05），而HeLa/DDP组与pEX-2-空载组相比其迁移及侵袭能力无明显差异（p>0.05）。
　　4、WesternBlot结果：转染pEX-2P16(INK4a)后HeLa/DDP细胞中pERK1/2蛋白的表达水平较HeLa/DDP组逐渐升高；P-gp蛋白的表达水平较HeLa/DDP组逐渐降低。
　　结论：
　　P16(INK4a)可能是通过ERK1/2信号通路的磷酸化来部分逆转宫颈腺癌顺铂耐药。