不同运动模式对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖指标以及烟酰胺N-甲基转移酶(NNMT)蛋白表达的影响

摘要

糖尿病是是机体内以血浆里的葡萄糖浓度水平比正常血糖高为特征的慢性内平衡失调方面的代谢性综合疾病，主要以慢性高血糖、胰岛素不足及酮症为临床特征，通常表现为整体性的代谢紊乱，也称“代谢综合症”，是危害人类健康的重大疾病之一。到目前为止，也没有彻底根治它的手段。随着基因组学和蛋白质组学等新技术的应用，为缓解和治疗糖尿病提供了新的途径。根据已有的调查研究发现，NNMT在脂肪组织和肝脏组织中是高表达的，而NNMT过表达会损害β细胞引起胰岛素分泌异常，这可能是糖尿病发病的一个重要的分子机制，而运动可以降低体重以及胰岛素抵抗，调节脂代谢，研究不同运动模式对Ⅱ型糖尿病大鼠中NNMT表达的影响，也可以进一步的了解运动对糖尿病发病机制的作用，从而为Ⅱ型糖尿病的治疗提供更加科学有效的运动疗法。
　　研究目的：
　　观察不同运动模式对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖指标的影响；观察不同运动模式组大鼠组织中NNMT表达的情况，为Ⅱ型糖尿病的运动疗法提供科学依据。
　　实验方法：
　　本论文以44只SD健康雄性大鼠作为实验的研究对象，随机选择8只为健康控制组（HC组），以基础饲料正常喂养；其余的36只以基础饲料适应性喂养一周后再以高脂高糖饲料喂养四周，喂养四周后注射STZ（链脲佐菌素）建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型，之后再将造模成功的27只大鼠随机挑选24只分成三组，糖尿病安静组（DC组）、糖尿病有氧持续运动组（DOC组）、糖尿病无氧间歇性运动组（DAI组），每组8只，每组都是以基础饲料喂养。然后对运动组施加6周不同运动模式的干预，有氧持续运动组的跑台速度为15m/min，无氧间歇性运动组的跑速为25m/min。训练频度为每周6天，运动时间为40分钟。每周训练完后禁食称重后取尾静脉血测空腹血糖。在6周的训练全部结束后，用乙醚麻醉，用EDTA管取右心房静脉血1.5-2ML，室温静置30min凝固后2000r离心15min，分离血清，标记好后放于-80℃冰箱保存待测。之后再立即取肝、脂肪、以及胰腺等组织，用锡箔纸包好，做好标记，然后放入装有液氮的容器内，再放入-80℃冰箱保存待测。检测指标：采用三诺血糖仪测试空腹血糖；用ELISA试剂盒测试血清胰岛素和糖化血红蛋白；各组织中NNMT的含量采用Western Blot免疫印迹法检测。
　　实验结果：
　　（1）6周训练后，DAI组的血糖与DC组和DOC组比下降得非常明显(P＜0.01)，有显著性差异，并且与运动前相比较，也下降的非常显著（P＜0.01）；6周训练完后，DAI组的糖化血红蛋白与DC组和DOC组比较也明显下降，有显著性意义（P＜0.05）。
　　（2）6周训练后，DAI组的胰岛素敏感指数与DC组和DOC组比有明显的上升，有显著性差异(P＜0.05)；虽然DOC组与DC组也有所上升，但是差异不显著；6周训练后，DAI组的胰岛素抵抗指数与DC组和DOC组比有明显的下降，有显著性差异(P＜0.05)；虽然DOC组与DC组也有所下降，但是差异不显著。
　　（3）所有糖尿病组大鼠（DC，DOC和DAI组）肝脏中NNMT的表达都明显高于HC组（P＜0.05），6周训练后，DAI组肝脏中NNMT的表达明显低于DC组（P＜0.05），而DOC组肝脏中NNMT的表达与DC组相比没有显著性差异（ P＞0.05）；运动组肌肉组织中 NNMT的表达都高于 DC组，有显著性差异（P＜0.05），虽然DAI组略高于DOC组，但是差异并不显著（P＞0.05）。
　　实验结论：
　　（1）无氧间歇性运动具有明显的降血糖和降糖化血红蛋白的效果，而有氧持续性运动降血糖和降糖化血红蛋白的效果不明显。
　　（2）无氧间歇性运动对提高糖尿病大鼠的胰岛素敏感性和和缓解糖尿病大鼠的胰岛素抵抗具有明显的的效果，而有氧持续性运动的效果不明显。
　　（3）肝脏中NNMT的蛋白表达水平与空腹血糖水平和胰岛素抵抗指数的变化几乎完全一致。对肝脏中NNMT蛋白表达具有明显的抑制效果可能是无氧间歇性运能更有效地降低血糖和缓解胰岛素抵抗的主要原因。

目录

声明

引言

1 实验对象与方法

1.1 实验对象

1.2 实验方法

1.3 实验所需器材及试剂

1.4 数据统计

2 实验结果

2.1 不同运动模式对大鼠空腹血糖（FBG）的影响

2.2不同运动模式对大鼠糖化血红蛋白（HBA1c）的影响

2.3不同运动模式对大鼠胰岛素敏感指数(IAI)和胰岛素抵抗指数(IRI)的影响

2.4不同运动模式对大鼠不同组织NNMT表达的影响

3 讨论与分析

3.1 两组运动模式的建立

3.2 不同运动模式对糖尿病大鼠常用血糖指标的影响

3.3 不同运动模式对糖尿病大鼠组织中NNMT表达的影响

4 结论

5 文献综述

5.1糖尿病的分型

5.2 糖尿病的诊断标准

5.3糖尿病的发病原因

5.4糖尿病的危害

5.5 运动对糖尿病的影响

5.6 NNMT与糖尿病的关系

5.7 NNMT与其他疾病5.7.1 NNMT与癌症

5.8 运动与NNMT的关系

参考文献

致谢