猪瘟兔化弱毒苗抗原量测定方法的探索及不同免疫程序的差异性比较研究

摘要

猪瘟(Classical swine fever,CSF或hog cholera，HC)，是由黄病毒科的猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病，该病可分为最急性型、急性型、慢性型、非典型型或迟发型。该病被国际兽疫局(OIE)列为必须上报的A类病，目前仍然遍布全世界。在我国，尽管猪瘟兔化弱毒苗的大范围使用有效地控制了猪瘟的急性发生和大流行。近些年来，我国猪瘟的流行发生了较大变化，出现了慢性和迟发型猪瘟，为猪瘟的防控带来了新的难题。本研究主要对当前使用的猪瘟兔化弱毒苗中猪瘟病毒的含量测定和猪瘟免疫程序等进行了深入的研究，对当前猪瘟的防制提出新方法。
　　 本研究主要包括以下三部分：
　　 1、简单、快速地测定猪瘟病毒的含量是猪瘟兔化弱毒苗(HCLV)生产工艺中难以解决的技术之一。本试验通过应用猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒(IDEXXHerdCheck Co.)，对已知滴度的24份HCLV半成品细胞苗和21份成品疫苗进行抗原含量测定，结果发现，对于24份HCLV半成品细胞苗，ELISA检测方法9与兔体定型热反应结果符合率达95.83％。其中，ELISA方法检测敏感性可达20头份/瓶(或109个病毒拷贝数/瓶)，但该方法无法区分猪瘟病毒抗原与牛流行性腹泻病毒抗原。试验结果证明，IDEXX猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒能够稳定、快速、简单地用于HCLV细胞苗的半成品与成品的病毒含量测定，为疫苗生产的质量控制提供了一种可靠和稳定的方法。
　　 2、目前在对猪瘟的防治实践中，对猪瘟超前免疫后抗体水平的变化及保护效果存在争议。本试验通过对规模化猪场的应用观察，选择3窝仔猪采用超前免疫，仔猪出生后即免疫猪瘟脾淋苗0.5头份/只，隔1～1.5小时采食初乳；2窝仔猪采用猪场常规免疫程序，21日龄免疫猪瘟脾淋苗1头份/只。应用猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.)对所有仔猪0、20、40、60日龄血清抗体监测，结果表明：在母源抗体水平较低的情况下采用超前免疫程序能够取得良好的免疫效果。
　　 3、为了研究猪瘟兔化弱毒苗在母猪妊娠期免疫对母猪及仔猪有无副作用、妊娠期接种猪瘟疫苗是否能够提高仔猪的母源抗体水平、根据仔猪的母源抗体水平确定仔猪的最佳免疫时间，从而确定仔猪的免疫程序。试验一：随机选择胎次相近、饲养、年龄等大体相同的妊娠母猪，在妊娠中期(分娩前50～59天、40～49天、30～39天)免疫猪瘟脾淋苗2头份，各组随机筛选部分所产仔猪(5头/窝)，应用猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.)对其进行抗体监测，仔猪于60日龄免疫猪瘟脾淋苗1头份，观察免疫效果。对照组，妊娠母猪不免疫，仔猪按照常规免疫程序(25日龄首免、60日龄二免)。试验二：在试验一的基础上，选择分娩前40～49天的妊娠母猪3头免疫猪瘟脾淋苗2头份，随机筛选部分所产仔猪(5头/窝)，应用猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.)对其进行抗体监测，采用60日龄首免、85日龄二免的免疫程序，观察其免疫效果。对照组，妊娠母猪不免疫，仔猪根据其抗体水平确定免疫程序。结果表明：猪瘟疫苗在母猪妊娠期免疫对母猪及小猪未发现明显副作用，试验组仔猪存活率为91.30％，对照组存活率为90.63％，结果无显著差异(P＞0.05)。对其所产仔猪采用采用60日龄首免、85日龄二免的的免疫程序较仅60日龄免疫一次的免疫程序有更好的免疫效果。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

文献综述

1我国传统猪瘟疫苗研制概况

2猪瘟疫苗的现状

3猪瘟的免疫程序

4猪瘟的控制与净化

研究一 应用猪瘟抗原/血清ELISA测定猪瘟兔化弱毒苗中的病毒含量

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

研究二 猪瘟兔化弱毒苗仔猪超前免疫程序研究

1材料与方法

2结果与分析

讨论

研究三 猪瘟兔化弱毒苗对妊娠母猪及其仔猪不同免疫程序差异研究

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

参考文献

致谢