体外诱导培养鸡胚破骨细胞及钙、磷对其活性的影响

摘要

为在细胞和分子水平上研究家禽破骨细胞形成及活化与骨代谢之间的关系，本试验拟在鸡胚破骨细胞诱导培养的基础上，通过形态学观察、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色与计数、骨磨片吸收陷窝对诱导生成的破骨细胞进行鉴定，研究钙磷因子对破骨细胞生存、诱导生成和骨吸收活性的影响，以期为家禽骨骼代谢疾病的研究提供一定的科学理论支持。试验结果如下：
　　 (1)首先利用1,25(OH)2D3的诱导作用，诱导培养出鸡胚OC，通过上述鉴定方法对OC进行特异性鉴定，证明了所诱导出的OC具有成熟OC的活性，且得出1,25(OH)2D3在浓度为10-8mol/L时诱导效果最佳；
　　 (2)在没有1,25(OH)2D3诱导作用下，添加不同浓度的钙、磷，发现高浓度钙、磷短时间内能抑制OC细胞的生存(＜16h)，中、低浓度组从24h开始对OC生存起抑制作用。到32h时，中高浓度组差异不显著，但与低浓度组差异极显著，各试验组与对照组差异都极显著；
　　 (3)在破骨细胞诱导培养体系中，分别添加不同浓度的钙、磷，结果显示：中高浓度的钙、磷对1,25(OH)2D3诱导OC的生成有抑制作用，而且能抑制OC的骨吸收活性；
　　 (4)本研究在体外诱导培养鸡胚OC培养的基础上，分别加入了不同比例的钙、磷，研究了其对体外培养OC生成、活化和骨吸收功能的影响。结果表明：当Ca∶P为2∶1时，对OC的诱导生成及骨吸收活性抑制作用最大，与对照组差异极显著。

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前言

文献综述

1.破骨细胞的研究进展

1.1破骨细胞的来源及其生物学性质

1.2 OC的骨吸收作用

1.3 OC的体外培养方法

1.4 OC的鉴定

1.5 OC的形成与活化机制

1.6影响OC的作用因素

2.骨代谢疾病与破骨细胞的关系

2.1骨代谢疾病简介

2.2 OC在骨代谢中的作用

3.钙、磷代谢对OC及骨代谢的研究进展

3.1钙、磷在体内的吸收代谢、功能及调控

3.2钙、磷的摄入量与比例对骨代谢及OC的影响

第二章试验研究

试验一1，25(OH)2D3体外诱导培养鸡胚破骨细胞

1材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

试验二钙对体外诱导培养鸡胚破骨细胞的生成及骨吸收活性的影响

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

试验三磷对体外诱导培养鸡胚破骨细胞生成及骨吸收活性的研究

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4讨论

5.小结

试验四不同钙磷比对体外诱导培养鸡胚破骨细胞生成及骨吸收的影响

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4讨论

5.小结

第三章全文结论

参考文献

致谢

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