摘要
1.1.1番茄的起源与栽培
1.1.2番茄的价值
1.2番茄枯萎病的症状及研究进展
1.2.1番茄枯萎病的病原菌及症状
1.2.2番茄枯萎病的防治策略
1.2.3番茄枯萎病病原菌与寄主番茄的互作
1.3小RNA(sRNA)在植物抗病过程中的功能
1.3.1 sRNA的功能和分类
1.3.3 miRNA作为调控分子跨界参与寄主-病原菌互作
1.4 RNA干扰调节植物免疫
1.4.2 RNAi的应用
1.5本研究的目的及意义
2.1.1植物材料及其生长条件
2.1.2病原菌材料及其生长
2.1.3载体
2.2实验方法
2.1.1番茄种子灭菌
2.1.2尖孢镰刀菌侵染番茄材料
2.2.4 Northern blot
2.2.5番茄根部原生质体分离
2.2.7大肠杆菌DH5α感受态制备和转化
2.2.8根癌农杆菌LBA4404感受态制备和转化
2.2.9根癌农杆菌GV3101感受态制备和转化
2.2.10烟草共表达载体的构建和烟草瞬时表达
2.2.11病毒介导的基因沉默(VIGs)载体构建和表达
2.2.12蛋白免疫印迹杂交
2.2.13番茄CRISP/Cas9基因敲除载体构建
2.2.14番茄过表达载体构建
2.2.15农杆菌介导的番茄转化
2.2.16抗体制备
2.2.17尖孢镰刀菌DNA提取
2.2.18尖孢镰刀菌原生质体转化
2.2.19番茄基因组DNA提取
2.2.20 RNA-IP
2.2.21番茄枯萎病病害等级划分
3.1.1文库构建及测序分析
3.1.2 folmiR1的挖掘
3.2寄主番茄中的靶基因的验证
3.2.1 folmiR1在寄主番茄中的靶基因预测
3.3靶基因功能研究及应用
3.3.1 folmiR1靶基因功能研究
3.3.2靶基因转基因番茄的构建
3.4病原菌小RNA跨界调控番茄枯萎病抗性作用机制的探索
3.4.1模式植物拟南芥中folmiR1作用机制的探索
3.4.2番茄中参与folmiR1作用机制基因的初步筛选
3.4.3候选基因抗体制备
3.5 FOL中小RNA合成相关基因的敲除
4讨论
4.1番茄尖孢镰刀菌小RNA跨界调控番茄抗枯萎病的功能
4.2以RDR1为靶标的新型抗尖孢镰刀菌生物制剂的探索
4.3番茄尖孢镰刀菌小RNA跨界调控番茄抗枯萎病的机理初探
5全文总结
参考文献
7附录
致谢
9攻读学位期间发表的学术论文目录
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