紫杉醇纳米脂质载体的制备与特性研究

摘要

纳米载药系统(nanoparticle drug carrier,NDC)是指药物与药用材料一起形成的粒径为1～1000 am的药物输送系统。NDC在改善药物的物理化学性质、降低药物的毒副作用、实现靶向给药、控释、缓释等方面具有良好的应用前景。随着纳米技术的日趋发展，纳米脂质载体(naostructure lipid carrier，NLC)展现了其新的优势。NLC是由固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles，SLN)发展而来的，与SLN的单一固体脂质基质相比，NLC由几种熔点不同的固、液混合脂质作基质，可以避免脂质形成完整晶格，将药物排挤出来，以增加药物的载带；同时，NLC继承了SLN的一些优点，如生理相容性好、保护药物不受化学降解，它成本低廉、制备方法简单，如高压乳匀法，易进行产业化生产，并且可以将其制成片剂、丸剂、胶囊以及粉剂以满足各种需要。 目的：研究制备一种新型的药物载体——纳米脂质载体(NLC)，以紫杉醇为模型药物，以期改善药物的溶解性，提高药物的包封率、载药量，改变其体内分布，延长体内循环时间，延长生物半衰期，同时改进包封率、载药量的检测方法。 方法：采用高压乳匀法～热乳匀法制备纳米载体，激光粒度仪检测纳米粒的粒径及其分布，扫描电镜观察纳米粒的形态及其分布，用HPLC和核素示踪方法检测并计算药物的包封率和载药量，荧光及核素示踪实验定性和定量观察纳米粒进入细胞的状况。 结果：建立用高压乳匀法制备的紫杉醇纳米脂质载体的最佳方法，通过纳米粒的特征筛选出了其较佳的制备方法是：将紫杉醇、硬脂酸、胆固醇、卵磷脂、玉米淮用少量的有机溶剂溶解后搅拌均匀，保持温度在70℃±5℃，挥发掉有机溶剂后，将其用注射器注入相同温度的含吐温-80(1％)(w/v)的水溶液中，边加边搅拌(1200rpm)，加完后续搅1h，迅速冷却到室温即得到初乳，将初乳在60 psi的压力下乳匀6次，碎冰冷却即得到TAX-NLC。此方法制备的TAX-NLC平均粒径为66±6 nm(n=3)，PDI为0.45±0.02(n=3)；HPLC和放射性核素示踪法测定得到纳米粒的平均包封率分别为68.78％±0.02(n=3)和81.279/0±0.03(n=28)，平均载药量分别为1.44％±0.02(n=3)。激光共聚焦显微镜观察到荧光标记的TAX-NLC能够进入肿瘤细胞中，细胞内荧光强度10分钟便开始上升，到2小时达达到饱和，进一步观察发现纳米粒进入细胞后，初期主要分布于细胞膜内侧一圈，随后在细胞一端聚集成高亮块，表明纳米粒进入细胞存在主动转运过程，其进入细胞的机制有待进一步实验研究；用<'125>I标记的TAX-NLC进行核素示踪研究也得到相似结果，纳米粒进入细胞在2小时基本达到饱和，通过TAX-NLC的主动载带，紫杉醇在细胞内高度浓聚，细胞内外紫杉醇浓度比达29，每个细胞中进入的紫杉醇可达1亿8千万个分子，能够满足抑制肿瘤细胞生长、增殖的要求。 结论：本实验研制的TAX-NLV是一种很有前途的载体系统。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

第一部分紫杉醇脂质纳米载体的制备及特性

第二部分高效液相色谱法测定紫杉醇及其脂质纳米粒包封率的方法学研究

第三部分紫杉醇脂质纳米载体的生物学特性研究

全文总结

参考文献

综述 抗肿瘤药物靶向载体系统的研究与开发

在读期间发表文章

附 录

致 谢