HtrA1丝氨酸蛋白酶表达对肝癌细胞凋亡和多药耐药的影响

摘要

目的：研究人原发性肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)中HtrA1丝氨酸蛋白酶(HtrA1serineprotease)的表达水平及其与临床病理特征之间的关系，分析HtrA1与细胞凋亡蛋白酶-天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Aspartate-specificcysteineproteases3，Caspase-3)、多药耐药(multidrugresistance，MDR)基因MDR1及其蛋白表达产物P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)之间的相关性，探讨HtrA1丝氨酸蛋白酶表达对肝癌细胞凋亡和多药耐药的影响。 方法：采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Realtime-PCR)和免疫组织化学方法分别检测手术切除的肝细胞癌患者的肝癌组织标本及癌旁肝组织标本中htrA1与Caspase-3mRNA及蛋白的表达，并检测其中P-gp的蛋白表达。对所有病人进行随访，对随访结果进行生存率分析。 结果：肝癌组织中的HtrA1mRNA与Caspase-3mRNA均低于相应的癌旁肝组织中该基因的表达，免疫组化染色强度和阳性细胞数也是肝癌组织低于相应癌旁肝组织。P-gp免疫组化染色强度和阳性细胞数是肝癌组织高于相应癌旁肝组织。HtrA1与Caspase-3的mRNA和蛋白表达量与肝癌细胞的分化程度相关，肝癌细胞分化程度越低，HtrA1与Caspase-3的mRNA和蛋白表达量越低。P-gp的蛋白表达量也与肝癌细胞的分化程度相关，相反地，肝癌细胞分化程度越低，则P-gp的蛋白表达量越高。HtrA1与Caspase-3的mRNA和蛋白表达呈正相关关系，P-gp的蛋白表达与HtrA1、Caspase-3的蛋白表达呈负相关关系。随访结果显示HtrA1、Caspase-3免疫组化阳性染色的患者的预后较好，而P-gp阴性染色的患者的预后较好。多因素COX回归分析显示HtrA1蛋白表达水平和肿瘤病理分级(Edmonsongrade)是肝癌患者预后的独立影响因素。 结论：HtrA1在肝癌中的表达可作为肝癌的预后或转移复发的指标之一。Caspase-3低表达或失表达与凋亡抵抗和多药耐药有关。P-gp还可能具有抗凋亡作用，能接抗Caspase-3的作用，引起多药耐药。HtrA1可能诱导Caspase-3活化，促进肿瘤细胞凋亡，抑制多药耐药蛋白P-gp的表达。

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