尿酸减轻6-OHDA介导PC12细胞氧化损伤作用机制的研究

摘要

第一部分尿酸减轻6-OHDA对PC12细胞的氧化损伤作用
　　 目的：评价尿酸减轻6-OHDA对PC12细胞的氧化损伤作用。
　　 方法：采用高分化PC12细胞制作帕金森病细胞模型，分为对照组(、6-OHDA(100μmol.L-1)组、尿酸(200μmol.L-1)和6-OHDA(100μmol.L-1)+尿酸(200μmol.L-1)组，分别作用于6h、12h和24h。采用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量，ELISA法测定8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy2'-deoxyguanosine，8-OHdG)含量观察DNA受损情况，硫代巴比妥酸法测定脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量。
　　 结果：100μmol.L-16-OHDA作用于PC12细胞12h、24h后，与对照组相比，LDH释放显著增加(757.57±27.77 U/L vs175.57±10.50 U/L，874.83±16.93 U/L vs161.76±9.71 U/L，P<0.05)、8-OHdG生成增多(66.55±4.08 ng/L vs19.61±2.04 ng/L，82.88±5.40ng/L vs20.97ng/L±5.14 ng/L，P<0.05)、MDA生成量显著增加(2.96±0.14μmol/gpro vs0.67±0.10μmol/g pro，4.22±0.35μmol/g pro vs0.68±0.09μmol/g pro，P<0.05)；尿酸组与对照组相比各项指标均无统计学差异(P>0.05)；6-OHDA+尿酸组与6-OHDA组相比，LDH释放显著降低(472.73±18.18 U/L vs757.57±27.77 U/L，522.25±16.37U/L vs874.83±16.93U/L，P<0.05)、8-OHdG含量下降(51.59±3.12ng/L vs66.55±4.08 ng/L，63.83±4.25 ng/L vs82.88±5.40 ng/L，P<0.05)、MDA生成减少(2.08±0.29μmol/g pro vs2.96±0.14μmol/g pro，2.55±0.36μmol/g pro vs4.22±0.35μmol/gpro，P<0.05)。
　　 结论：尿酸对6-OHDA介导的PC12细胞氧化损伤具有保护作用。
　　 第二部分尿酸减轻6-OHDA介导的PC12细胞SOD及GSH活性下降
　　 目的：探讨尿酸减轻6-OHDA介导的PC12细胞氧化损伤机制。
　　 方法：采用高分化PC12细胞制作帕金森病细胞模型，分为对照组、6-OHDA(100μmol.L-1)组、尿酸(200μmol.L-1)和6-OHDA(100μmol.L-1)+尿酸(200μmol.L-1)组。100μmol.L-16-OHDA分别作用于6h、12h、24h，比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)和还原性谷胱甘肽(GSH)的活性变()。
　　 结果：100μmol.L-16-OHDA作用于PC12细胞12h、24h后，与对照组相比，SOD活性显著降低(13.48±0.53 U/L vs30.40±0.53 U/L，10.02±2.16 U/L vs30.49±0.62U/L，P<0.05)、GSH含量显著下降(2.93±0.53μmol/g pro vs5.72±0.35μmol/g pro，2.41±0.24μmol/g pro vs6.23±0.40μmol/g pro，P<0.05)；尿酸组与对照组相比各项指标均无统计学差异(P>0.05)；6-OHDA+UA组与6-OHDA组相比，SOD活性显著增强(19.47±2.14 U/L vs13.48±0.53 U/L，16.09±1.71 U/L vs10.02±2.16 U/L，P<0.05)，GSH活性明显增强(3.94±0.20μmol/g pro vs2.93±0.53μmol/g pro，3.68±0.13μmol/g pro vs2.41±0.24μmol/g pro，P<0.05)。
　　 结论：尿酸能够明显减轻6-OHDA介导的PC12细胞的SOD和GSH活性下降。