应激影响色素脱失模型小鼠黑色素合成机制的初步探讨

摘要

目的：⑴两种色素脱失模型方法的建立和比较,为进一步研究提供最佳模型。⑵从神经、免疫、内分泌三方面探讨应激对色素脱失模型小鼠皮肤黑色素合成影响的生理机制,为色素脱失性皮肤病预防、治疗及其新药开发提供新思路和更可靠的实验依据。
　　 方法：①分别采用过氧化氢和氢醌两种脱色法建立色素脱失动物模型并对两种方法进行比较。②采用C57BL/6J雄鼠,随机分为空白对照组(Ctrl组)、氢醌组(HQ组)、氢醌+束缚应激组(HQ+RS组)、氢醌+干扰素组(HQ+IFN组)、氢醌+氢化可的松组(HQ+GC组),应用氢醌进行色素脱失,并在此基础上分别对HQ+RS组进行束缚应激,对HQ+IFN组注射α-2a重组人干扰素,对HQ+GC组注射和氢化可的松。实验结束后,常规固定海马并制作HE染色切片,镜下观察CA3区组织变化；固定皮肤组织并制作HE染色切片,镜下观察皮肤组织结构变化,并对毛囊进行计数；对胸腺、脾脏称重并计算胸腺、脾脏指数；采用ELISA试剂盒检测血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)及促肾上腺皮质激素(ACTH)含量。
　　 结果：⑴过氧化氢造模,小鼠皮肤损害严重,但毛发生长未受明显抑制；而采用氢醌造模,小鼠几乎无肉眼可见的皮肤损害,但皮肤毛囊生长受到明显抑制。这说明氢醌建立色素脱失模型更好。⑵HQ+RS组、HQ+IFN组、HQ+GC组小鼠体重、旷场实验行为学评估均不同程度低于Ctrl组和HQ组,提示束缚应激、注射α-2a重组人干扰素和氢化可的松可成功模拟应激反应；同Ctrl组和HQ组相比,HQ+RS组、HQ+IFN组、HQ+GC组小鼠海马CA3区出现神经细胞排列不整齐、数量减少和结构改变；HQ组、HQ+RS组、HQ+IFN组小鼠血清IgG显著高于Ctrl组(P<0.05),而HQ+GC组显著低于Ctrl组；HQ组、HQ+RS组、HQ+IFN组、HQ+GC组小鼠血清IgM含量均显著高于Ctrl组(P<0.05)；HQ+RS组、HQ+GC组和HQ+IFN组均小鼠胸腺指数低于HQ组和Ctrl组(P<0.05)；HQ+RS组、HQ+GC组小鼠脾脏指数低于HQ组和Ctrl组,而HQ+IFN组高于HQ组和Ctrl组(P<0.05)；HQ+RS组、HQ+IFN组、HQ+GC组小鼠血清ACTH含量均显著高于Ctrl组和HQ组(P<0.05)；Ctrl组相比,HQ组、HQ+RS组、HQ+IFN组、HQ+GC组小鼠皮肤总毛囊数目和生长期毛囊数目显著减少(P<0.05)；同HQ组相比,HQ+RS组、HQ+IFN组、HQ+GC组小鼠皮肤总毛囊数目有不同程度的减少。
　　 结论：①氢醌能更好地从抑制色素合成方面阻断黑色素的产生,从而建立色素脱失模型。②束缚应激、α-2a IFN的注射和氢化可的松注射,能较好地从心理、免疫、内分泌学角度模拟机体应激反应。③束缚应激通过机体神经、免疫、内分泌三大系统的改变对皮肤黑色素的合成产生影响。④通过注射α-2a IFN增加免疫因子后,机体神经和内分泌系统发生改变,进而对皮肤黑色素合成产生影响。⑤通过注射氢化可的松增加机体糖皮质激素后能够更显著的对皮肤黑色素合成产生抑制作用,而这种影响重要是通过改变机体的神经与免疫来发挥作用的。

目录

文摘

英文文摘

引言

一 应激与疾病

二 应激相关性皮肤疾病及其研究进展

三 应激与色素脱失性皮肤病

四 本文的研究思路

第一部分 色素脱失模型建立方法探讨

一 试剂和仪器

二 实验动物和分组

三 实验方法

四 实验结果

五 讨论

六 小结

第二部分 应激影响色素脱失模型小鼠黑色素合成的机制探讨

一 试剂和仪器

二 实验动物和分组

三 实验方法

四 实验结果

五 讨论

六 小结

结论与展望

参考文献

综述

参考文献

攻读硕士学位期间公开发表论文

致谢