核转录因子NAC1在肿瘤发生和发展中的作用和机制研究:对自噬和细胞衰老的调控作用

摘要

目的:
　　 研究核转录因子NAC1(伏隔核1，Nucleus accumbens-1)对肿瘤细胞治疗敏感性的调控机制，以及对肿瘤形成和恶性进展的影响。
　　 方法:
　　 采用细胞生物学、分子生物学、药理学和动物实验学等多种方法检测:
　　 1) NAC1对细胞自噬的调控作用以及NAC1介导的自噬对临床化疗药物顺铂敏感性的影响;
　　 2）NAC1对细胞衰老的调控作用以及NAC1介导的细胞衰老逃逸对肿瘤细胞增殖，以及细胞恶性转化和致瘤性的影响。
　　 结果:
　　 本研究发现:
　　 1）NAC1是一个全新的自噬调节因子。在顺铂治疗下，NAC1可引起自噬相关蛋白LC3Ⅱ(microtubule-associated protein1 light chain 3)水平上调、p62蛋白（它可参与自噬途径降解）水平下调、GFP-LC3荧光颗粒数以及细胞自噬小体增加。抑制NAC1介导的自噬激活可增强肿瘤细胞对顺铂的敏感性，表现为细胞活力减弱、凋亡细胞数增加，以及凋亡相关蛋白—剪切的Caspase 3和PARP水平上调。本研究揭示，NAC1介导的自噬激活是通过调控高迁移率族蛋白HMGB1的表达、易位和释放而实现的。NAC1可促进顺铂治疗产生的HMGB1从胞核到胞浆的易位以及HMGB1从胞浆向胞外的释放。在顺铂治疗下，沉默HMGB1的表达则可明显抑制NAC1介导的自噬激活。
　　 2)NAC1亦是一个全新的细胞衰老抑制因子。NAC1可逃逸辐射和致癌因子诱导的细胞衰老发生，其表现为SA-β-gal阳性细胞数减少、细胞增殖能力和细胞克隆形成数增加、细胞周期蛋白依赖激酶抑制蛋白-p21表达下调。RT-PCR和荧光素酶报告基因检测结果显示，NAC1通过调控ΔNp63（DeltaNp63为p63蛋白的主要表达形式）转录来逃逸辐射和致癌因子诱导的细胞衰老，促进肿瘤细胞的增殖，从而有利于致癌因子Ras诱导的MEF细胞的恶性转化，并在动物模型中促发肿瘤的形成。
　　 结论:
　　 NAC1通过影响HMGB1的表达、易位和释放介导自噬激活，并参与肿瘤细胞对化疗药物顺铂敏感性的调控;在辐射和致癌因子刺激下，NAC1通过影响ΔNp63转录水平的活性抑制细胞衰老发生并在促肿瘤细胞增殖、MEF细胞的恶性转化和肿瘤形成过程中起着重要的作用。以上这些发现有助于我们进一步了解核转录因子NAC1在肿瘤发生发展中的分子和细胞功能，并为肿瘤的预防和治疗提供了一个新的可能的潜在靶点。

目录

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前言

第Ⅰ章 NAC1对自噬及化疗药物顺铂敏感性的调控研究

研究背景

材料与方法

实验结果

讨论

第Ⅱ章 NAC1对细胞衰老的调控机制和对肿瘤发生发展的影响

研究背景

材料与方法

实验结果

讨论

参考文献

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致谢